詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
250T|500T|1000T | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒是應用二甲氧唑黃2,3-bis[2-methoxy -4-nitro-5-sμlfophenyl]-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產品。 XTT在電子耦合試劑存在的情況下能夠被線粒體內的一些與輔酶Ⅱ相關的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與活細胞數量成正比。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數量呈線性關系。 本XTT試劑為配制好的即用型試劑,直接加入到細胞樣品中,不需要預配各種成分,XTT試劑很穩定,對細胞沒有毒性,可以長時間孵育細胞。XTT 法測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數目的靈敏度高,無放射性,檢測細胞增殖實驗的靈敏度比其它方法如MTT高。 儲存條件:2-8℃避光保存。長期存放-20℃避光保存。 注意: 1.XTT試劑短期存放于2-8℃,長期存放請分裝后-20℃避光保存。 2.避免反復凍融。 3.凍存后溶解時注意重新混勻。 有效期:一年。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
L-腎上腺(標準品)英文名稱: Sumatriptan succinate 順鉑耐藥相關蛋白9抗體包裝5g
L-絲(標準品)英文名稱: Streptomycin Sulphate22號染色體開放閱讀框40抗體包裝1g
L-天門冬(標準品)英文名稱: Streptomycin Sulphate嗜粒趨化蛋白3抗體包裝1g
L-巖藻糖(標準品)英文名稱: Dihydrostreptomycin Sulphate21號染色體開放閱讀框33抗體包裝250mg
L-異亮(標準品)英文名稱: Diclofenac sodium角蛋白15抗體包裝5ml
Lenalidomide(標準品)英文名稱: Diclofenac sodium角蛋白14抗體包裝1g
Letrozole(標準品)英文名稱: Gabapentin神經NB3特定蛋白抗體包裝1g
Levonorgestrel(標準品)英文名稱: Gabapentin促胃泌受體抗體包裝5g
Loperamide HCl(標準品)英文名稱: Domperidone單克抗體包裝1g
Losartan Potassium英文名稱: Domperidone2號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
m-酚-4-磺銨(聚酚磺雜質)(標準品)英文名稱: Niclosamide間粘附分子3抗體包裝1g
m-酚-4,6-二磺銨 (聚酚磺雜質)(標準品...英文名稱: Niclosamide染色質結合蛋白Cbx8抗體包裝1g
m-酚-6-磺銨(聚酚磺雜質)(標準品)英文名稱: Ciprofloxacin降鈣抗體包裝25g
MB1120-S英文名稱: Ciprofloxacin降鈣基因相關肽1型受體抗體包裝5g
Medroxyprogesterone acetate...英文名稱: FamciclovirCD19抗體包裝500mg
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>98.5%血漿激肽釋放試劑盒L-纈;L-Valine
: JCM13471資源名稱: DSMZ17855, Type strain 質量規格:HPLC>98%,標準品血漿α顆粒膜蛋白試劑盒香草;4-hydroxy-3-meth
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質量規格:>98.5%,BR血紅氧合2試劑盒雪松;Cedrol
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒釀酒酵母 1-N-BOC-4-乙酰基尿激肽原1Elisa
糙皮側耳 2,4,6-三氟異硫酸苯酯彈性蛋白Elisa
佐久氏沙雷氏 3-苯氧基苯甲酰肼DNA甲基化轉移3AElisa
總狀毛霉 1-丁基-3-氟苯DNA甲基化轉移3BElisa
釀酒酵母 反式-2-三氟甲基肉桂酸副流感病Elisa
稻黑孢霉 (二甲基氨基)二甲基(2,3,4,5,6-五氟苯氧基)亞六氟磷酸鹽抗磷脂酰絲氨酸抗體Elisa
缺陷短波單胞 3-氯吡啶-2-甲核酸外切1Elisa
無 5-氯-2-苯并噻唑啉酮核酸外切1Elisa
靈芝(紅芝,赤芝)(可訂購) 2-羥基-3-基吡啶耳石蛋白1Elisa
孟氏假單胞 2-氟-4-橋粒芯蛋白3IgGElisa
孢吸水鏈霉 5-溴-2-氯-4-(苯氧基)-嘧啶蛋白精氨酸脫亞氨4Elisa
白井盤多毛孢 3-基-5-硝基三氟甲苯瓜氨酸化抗凝血Elisa
凝結芽胞桿 Fmoc-D-3-基苯氨酸c-fosElisa
金產色鏈霉 Fmoc-L-3-基苯氨酸色CElisa
蟲草屬 Fmoc-D-2-氯苯氨酸可溶性內皮生長因子Elisa