商品介紹:
MLN1117是一種選擇性的p110α抑制劑,IC50值為15nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1268454-23-4 別名:Serabelisib;INK1117 純度:99.87% 分子量:363.37 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
p110α抑制劑(MLN1117) | MLN1117 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
橄欖色青霉生物標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-A1BG Antibody巢蛋白(NID)
南方樹舌Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-Mouse Serum Albumin Antibody超氧化物歧化1(SOD1)
釀酒酵母Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-LRATD2 Antibody常染色體隱性遺傳性耳聾59蛋白(DFNB59)
紅淡紫灰鏈霉菌PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-SYNCRIP(HNRNPQ)(Human) pAb腸型脂肪結(jié)合蛋白(FABP2)
黑曲霉PE-Cy7標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-LRAT Antibody腸堿性磷(ALPI)
金黃殼囊孢菌Cy3標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AARSD1 Antibody叉頭框蛋白P3(FOXP3)
日本曲霉Cy5標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AAAS Antibody叉頭框蛋白P1(FOXP1)
肺炎克雷伯氏菌Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-ABCA8 Antibody叉頭框蛋白O3(FOXO3)
枝孢霉Cy7標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AASDHPPT Antibody叉頭框蛋白O1(FOXO1)
栗色牛肝菌PE標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AASS Antibody叉頭框蛋白C1(FOXC1)
豬丹絲菌PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-ABCB5 Antibody層粘連蛋白γ3(LAMγ3)
香蕉PE-CY5標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-ABCB1 Antibody層粘連蛋白γ2(LAMγ2)
褐球固氮菌APC標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-AASDHPPT Antibody層粘連蛋白γ1(LAMγ1)
法氏沃氏黃桿菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗人IgGAnti-ABCA13 Antibody層粘連蛋白β4(LAMβ4)
土曲霉PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-ABCB7 Antibody層粘連蛋白β3(LAMβ3)
毛木耳PE-Cy7標(biāo)記的驢抗兔IgGAnti-ABCB8 Antibody層粘連蛋白β2(LAMβ2)
原鈣粘蛋白1抗體彎曲芽孢桿菌大鼠食管組織提取物
缺陷性分配同源物α抗體副凝聚短狀桿菌大鼠小腸組織提取物
表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體瓊氏不動(dòng)桿菌大鼠直腸組織提取物
原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體尿腸球菌大鼠腸組織提取物
p110α抑制劑(MLN1117)海桑小單孢 Bis-5,5-nortrachelogenin
釀酒酵母 Antidesmone
忠清南道鹽單胞 Alstolenine
嗜礦泉?dú)鈫伟?/span> Abiesinol F
海洋桿 9-O-Methyl-4-hydroxyboeravinone
粗毛纖孔 7β-Hydroxyrutaecarpine
彎孢 6α-Hydroxycleroda-3,13-dien- 16,
芽孢桿 5-Allyl-3-methoxy-6-methyl-7-(3,
漢遜德巴利酵母 2-(4-Hydroxyphenyl)-6-methyl- 2,
笠原考克娃酵母 16-Epikoumidine
叢毛紅曲 15-Methoxymkapwanin
疣梗曲霉 14-Benzoylneoline
裂褶 13-鄰去乙酰基紅豆杉 Z
多主葡萄殼 (E)-Aldosecologanin
紅酵母屬 黃花香茶菜甲