商品介紹:
Sirtinol是sirtuin的抑制劑,24小時(shí)內(nèi)抑制MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)的IC50值為48.6μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):410536-97-9 純度:98.0% 分子量:394.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
產(chǎn)氣腸桿菌(現(xiàn)1)抑制A/Inhibin α抗體Human RBM24(RNA Binding Motif Protein 24) ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)
布魯氏菌雞傳染性喉氣管炎病糖蛋白E抗體Human RBMS2 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2(TRAIL-R2/DR5)
不規(guī)則鹽海菌小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體Human RBM25 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)白介-7受體a抗體Human RBM26 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)
畫眉草彎孢整合α3抗體Human RBP2 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)
殼菌整合β5抗體Human ABCB5(ATP-binding cassette sub-family B member 5) ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)
枯草芽胞桿菌整合α1抗體Human RBMX2 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)
紫紅曲霉白介2受體β鏈抗體 IL-2RβHuman RBM39 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1(TRAF1)
pBlueScript SK(+)干擾α2b抗體Human RBM28 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體超家族成員18(TNFRSF18)
馬賽菌屬誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體Human RBM4 ELISA Kit腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)
狹霉鏈霉菌雞傳染性法氏囊病病抗體Human RBM42 ELISA Kit腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)
冷溫木拉克酵母白介-17抗體Human RBM46 ELISA Kit腫瘤壞死因子超家族15(TL1A/TNFSF15)
松口蘑5'肌苷磷脫氫2抗體Human RBM41 ELISA Kit腫瘤壞死因子γ(TNFγ)
大豆慢生根瘤菌即刻早期應(yīng)答基因5樣蛋白抗體Human RASGRP3(Ras guanyl-releasing protein 3) ELISA Kit腫瘤壞死因子β(TNF-β)
腸球菌屬整合αV抗體Human RBM14 ELISA Kit腫瘤壞死因子β(TNFβ)
泡盛曲霉白介-19抗體Human RBM15 ELISA Kit腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化(TACE)
鼠李糖乳桿菌Lactobacillus│rhamnosus GG 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷
ATCC10844=LMG2210資源名稱: 邊緣假單胞菌邊緣致病變種 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)仙鶴草酚B
米氏假單胞菌Pseudomonas│migulae 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)馬錢苷
sirtuin抑制劑(Sirtinol)根瘤 2-苯基細(xì)小病Elisa
牛布氏陽(yáng)性血清品(補(bǔ)體結(jié)合) 2,5-二乙氧基苯呼腸孤病III型Elisa
釀酒酵母 (-)-10,2-樟腦磺內(nèi)酰病性腹瀉Elisa
葡萄座腔 二苯基亞砜口蹄疫病Elisa
金黃殼囊孢 2-基-6-甲氧基苯并噻唑痘病Elisa
葡萄黑腐 對(duì)氨基丁酯細(xì)螺旋體病Elisa
皺褶莫氏黑粉 1-乙酰萘口蹄疫A型抗體Elisa
枯草芽孢桿 1-溴-3,5-二甲基金剛烷酪蛋白Elisa
雙氮纖維單胞 六三聚磷甲基酮Elisa
腐霉* 4-叔丁基苯甲布魯氏IgG抗體Elisa
菊粉血桿 苯酯流行性出血熱抗體Elisa
褐離褶傘 4--3-甲布魯氏IgM抗體Elisa
果生鏈核盤 異酯補(bǔ)體蛋白3Elisa
細(xì)鏈格孢 2-(溴甲基)萘補(bǔ)體蛋白4Elisa
殺真鏈霉 4-苯基吡啶熱休克蛋白40Elisa