詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
500μl | 1~3天 |
商品介紹:
DIOC16(3)PERCHLORATE 細胞膜染色試劑為綠色熒光標記的細胞膜探針,具有488 / 500nm的大激發/發射波長。 當親脂性的綠色熒光探針DIOC16(3)PERCHLORATE 進入細胞膜后,在整個細胞膜上擴散,佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液DIOC16(3)PERCHLORATE在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,被激發后可以發出綠色的熒光,具有很高的淬滅常數和激發態壽命。 熒光探針DIOC16(3)PERCHLORATE 通常不會明顯影響細胞的活力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑。除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。 細胞膜探針具有多種顏色可以選擇,可根據情況對樣品進行多色標記實驗。除了本試劑盒的綠色熒光探針,我公司還可以提供紅色、橙色、深紅色等顏色的染色試劑盒。 以96孔板每孔200μl染色液計,本試劑盒小包裝可以染色1000-5000個樣本。 儲存條件:染料-20℃避光保存;避免反復凍融。 有效期:六個月。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
綠絨蒿(標準品)英文名稱: Molecular sieves, 5 ?葡萄糖轉運蛋白3抗體包裝25g
綠原(標準品)英文名稱: Kaolin凝溶膠蛋白抗體包裝5g
化兩面針堿(標準品)英文名稱: Kaolin(superfine)生長激釋放激抗體包裝1g
化木蘭花堿(標準品)英文名稱: Kaolin(superfine)膠質纖維性蛋白抗體包裝5g
化矢車菊,花青(標準品)英文名稱: Kaolin(superfine)綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體)包裝25g
化纈草英文名稱: Kaolin(superfine)生長激受體抗體包裝5g
化血根堿(標準品)英文名稱: Kaolin腦腸肽抗體包裝1g
輪環藤根(標準品)英文名稱: Kieselguhr G糖蛋白A33抗體包裝5g
羅布麻寧;香草乙;夾竹桃麻(標準品)英文名稱: Silica gel腦腸肽抗體包裝1g
羅布麻葉(標準品)英文名稱: Silicon dioxide胰高血糖樣肽-2抗體包裝5g
羅漢果(標準品)英文名稱: SandG蛋白偶聯受體GPR114蛋白抗體包裝100g
羅漢果苷III(標準品)英文名稱: Sand膠質源性連接蛋白抗體包裝25g
羅漢果苷IV(標準品)英文名稱: Ammonium phosphate monobasic糖蛋白VI/六糖蛋白抗體包裝100g
羅漢果黃英文名稱: Dimethyl sulfoxide鳥苷還原1抗體包裝25g
羅漢果皂苷Iva英文名稱: N-N-DimethylacetamideG2期/S期應答相關蛋白1抗體包裝5g
苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質量規格:>99%,BR前列腺D2試劑盒毛蘭;Phenol
極細鏈格孢菌Alternaria│tenuissima 質量規格:HPLC>99%,標準品前列腺A1試劑盒木通乙苷B;Calceoriosid
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規格:純度>99%前列環試劑盒馬兜鈴Ⅰ;Aristolochic a
細胞膜染色試劑DiO生孢梭 聚烯酸抗胰蛋白抗體Elisa
紫晶口磨 聚烯酸抗前體Elisa
蘇云金芽胞桿 聚烯酸白分化抗原4Elisa
假單胞屬 聚烯酸過氧化還原1Elisa
日本裂殖酵母 聚烯酸分泌粒蛋白1Elisa
杜氏籃狀 聚烯酸器支原體IgG抗體Elisa
地中海中慢生根瘤 維生E聚乙二琥珀酸酯序列相似家族3成員BElisa
季也蒙邁耶氏酵母 聚氯乙烯蛋白水解誘導因子;皮離蛋白Elisa
釀酒酵母 聚氯乙烯纖維蛋白原IgG抗體Elisa
布魯氏 生物Ⅰ型 聚氯乙烯纖維蛋白原IgM抗體Elisa
擬青霉 聚氯乙烯纖維蛋白原IgA抗體Elisa
綠色木霉 Amberlite® IRA-410(Cl) 離子交換樹脂泰勒蟲抗體Elisa
盤長孢狀盤孢 Amberlite IR-120陽離子交換樹脂過氧化Elisa
小腸腸球 BOC-L-環基氨酸甘露糖結合蛋白2Elisa
濟州古名氣微 二氯雙[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]鈀(II)L-酸Elisa