化工儀器網
詳細介紹
商品介紹：
淋巴細胞分離液（Lymphocyte Separation Medium 1.084，簡稱LSM-1.084）是一種無菌的即用型分離液，基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過一些改良，使得操作簡單快速且分離效率更高。本品是無菌的聚蔗糖Ficoll/泛影酸鈉混合溶液，密度為1.084 g/ml，內毒素含量很低（＜0.12 EU/ml），是在嚴格控制的環境下加工的，條件符合ISO13485:2003標準和GMP認證。相對于密度為1.077 g/ml的人淋巴細胞分離液，本品適用于分離更高密度的人單個核細胞，包括外周血，臍帶血以及骨髓瘤來源的組織樣本。還適用于分離大小鼠血細胞，正因為嚙齒動物的淋巴細胞密度稍高于人淋巴細胞。 工作原理 去纖維蛋白或抗凝人血以1：1的比例用無菌生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，小心的添加在分離液上層（不要混雜在一起），之后離心30-40min。離心過程中，差速遷移使其終形成幾個不同的細胞分層： ①聚集在管底的顆粒主要是Ficoll 聚集的紅細胞以及沉淀物； ②緊挨著上面一層的顆粒主要是粒細胞，其處于LSM-1.084溶液的滲透壓臨界，具有足夠高的密度遷移穿過LSM-1.084溶液層。 ③單個核細胞分布在血漿和LSM-1.084分離液的中間層，還包括一些沉降系數低（密度低）的顆粒，如血小板。 淋巴細胞，單核細胞和血小板不具有足夠高的密度穿透LSM-1.084分離液層，因此這些細胞在血漿和LSM-1.084分離液層聚集形成一個中間分層。吸取中間層，用平衡鹽溶液短暫洗滌，以除去血小板，細胞分離介質和血漿，就可以單個核細胞。通常情況下，分離所得的細胞中95±5%為單個核細胞，細胞存活率＞90%，回收率為60±20%。 儲存條件：4～8℃，避光 |
產品屬性：
中文名稱：淋巴細胞分離液1.084
英文名稱：Lymphocyte separation medium1.084
產品規格：100ml
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
磷咯萘啶（標準品）英文名稱： TopiramateCAP1抗體包裝5g
磷喹（標準品）英文名稱： Tozasertib，VX-680/MK-0457粒-巨噬集落激因子3抗體包裝1g
磷哌喹（標準品）英文名稱： Trospium chloride 表面趨化因子受體7抗體包裝250mg
磷氫鈣（標準品）英文名稱： AG-014699色c氧化10抗體包裝5g
膦鈉（標準品）英文名稱： Carfilzomib/PR171CRTAM抗體包裝5g
硫噴妥（標準品）英文名稱： CEP-18770單核趨化蛋白4抗體包裝100ml
硫普羅寧（標準品）英文名稱： Managlinat Dialanetil/CS-917NK抑制性受體2DL3抗體包裝25ml
硫阿米卡星(標準品)英文名稱： Nolatrexed dihydrochlorideCRX抗體包裝100g
硫阿托品(標準品)英文名稱： PD 173074CD8抗體包裝25g
硫安普霉(標準品)英文名稱： PH-797804磷化原癌蛋白CBL2抗體包裝500g
硫巴龍霉(標準品)英文名稱： Tifluadom/KC-5103磷化原癌蛋白CBL2抗體包裝5g
硫長春堿(標準品)英文名稱： Valacyclovir HCl磷化周期依賴激2抗體包裝25g
硫長春新堿/硫基長春堿(標準品)英文名稱： Valacyclovir HCl磷化周期依賴激2抗體包裝5g
硫多粘菌B(標準品)英文名稱： Vecuronium Bromide分裂周期蛋白25抗體包裝25g
硫（標準品）英文名稱： Vecuronium Bromide磷化分裂周期蛋白25抗體包裝5g
腐皮鐮孢菌Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 質量規格：>98%纖連蛋白試劑盒苔黑酚葡萄糖苷;Orcinolgluco
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規格：HPLC≥98%,標準品纖調蛋白試劑盒太子參環肽B;Heterophyllin
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質量規格：>98%,USP,BR細小病B19試劑盒土木香內酯;Alantolactone
淋巴細胞分離液1.084納西桿 N-Boc-D-亮氨次Elisa
白靈菇 4-氨基-3-溴甲酯尿膽Elisa
假單胞 3-磺酰氨基乙酸甲酯-2-噻吩甲酸甲酯黃單核苷酸Elisa
殼囊孢屬 盧非酰色P45026B1Elisa
大腸埃希 月桂酸正丁酯游離球蛋白EElisa
大腸埃希氏 十三烷二酸環乙撐酯恙蟲病IgG抗體Elisa
匍枝根霉(黑根霉) 4-基-2-氟苯甲α-溶蛋白43-49Elisa
解烴棒桿 2-甲基基戊酸酯α1唾液淀粉Elisa
草假單胞 反式-4-(4-氟苯基)-3-羥甲基-1-甲基透明帶抗體Elisa
釀酒酵母 己酸異丁酯HCG抗體Elisa
橙色土地桿 富馬酸二丁酯尼克酰腺嘌呤二核苷酸Elisa
球毛殼 2-氟-5-甲氧基苯甲脂肪酸延長5Elisa
大腸埃希氏 巴豆酸乙酯Δ5去飽和Elisa
香菇 2-甲氧基-N-黃體生成受體Elisa
枯草芽胞桿 4-氯-3-羥基-丁卵泡受體Elisa
化工儀器網