公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SMYD2抑制劑
英文名稱:AZ505 ditrifluoroacetate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
AZ505ditrifluoroacetate是一種有效的選擇性的SMYD2抑制劑,IC50為0.12μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1035227-44-1 別名:AZ 505 ditrifluoroacetate;AZ-505 ditrifluoroacetate 純度:99.50% 分子量:805.59 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
亞銹褐褶菌外周髓鞘蛋白-22抗體Anti-CASP3(P12) AntibodyP鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)
大腸埃希菌平足蛋白抗體(淋巴管內(nèi)皮蛋白)Anti-CASP3 AntibodyP-TAU蛋白(P-TAU)
球孢白僵菌蛋白磷酯-1B抗體Anti-CASP2(small) AntibodyProminin 2(PROM2)
Taibaiella蛋白質(zhì)磷-2A抗體Anti-CASP3 AntibodyPL7抗體/抗蘇酰tRNA合成(PL7)
達(dá)班湖喜鹽芽孢桿菌磷酯-2Ac抗體Anti-CASP3(P12) AntibodyPL12抗體/抗酰tRNA合成(PL12/AlaRS)
紅球菌磷化-絲裂原活化蛋白激p38抗體(P-p38 MAPK)Anti-CASP4 AntibodyPC4,SFRS1互動(dòng)蛋白1(PSIP1)
米根霉D型-過(guò)氧化活化增生受體抗體Anti-CASP4 AntibodyP53(P53)
葉點(diǎn)霉屬過(guò)氧化活化增生受體γ抗體(PPARγ)Anti-CASP3(P17) Antibody(PB0183)P38蛋白激(P38MAPK)
塔賓曲霉孕激受體抗體Anti-CASP3(P17) AntibodyP27蛋白(P27)
矮小青霉脯羥化抗體Anti-CASP4 AntibodyP21蛋白(P21)
發(fā)酵畢赤酵母早老蛋白-1抗體Anti-CASP6(p18) AntibodyOX40配體(OX40L)
香菇早老蛋白-1抗體Anti-CASP6 AntibodyOJ抗體/抗異亮酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)
枯草芽孢桿菌早老蛋白-1抗體Anti-CASP7 Antibody(PB0397)N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)
芽胞桿菌前列腺干抗原抗體Anti-CASP7 AntibodyN-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)
皺紋假單胞菌突觸后密度蛋白95抗體Anti-CASP6(large) AntibodyN-甲基-D-天冬受體(NMDAR)
聚紅粉端孢霉P選擇抗體Anti-CASP8 AntibodyN鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)
硝孢鏈霉菌Streptomyces│nitrosporeus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,BR
銀絲草菇Volvariella│bombycina 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
SMYD2抑制劑大葉黃楊炭疽病 Pfizer腸球選擇性瓊脂(PSE瓊脂)胰島樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白3Elisa
炭疽桿 (可定) 北沙參亞碲酸鈉胨水培養(yǎng)基基礎(chǔ)整合β1Elisa
紅曲紅曲 磷酸鹽緩沖液(pH7.2)角化生長(zhǎng)因子Elisa
干巴革 沙門氏志賀氏增液脂肪Elisa
蠅卷霉 PH7.0緩沖蛋白胨溶液瘦受體Elisa
產(chǎn)氨短桿 0.1%煌綠巴氏桿Elisa
類阿達(dá)青霉 種保存培養(yǎng)基25羥基維生DElisa
根瘤 氣單胞鑒別瓊脂1,25二羥基維生DElisa
枯草芽孢桿 VRBG瓊脂25羥基維生D3Elisa
釀酒酵母 腸道增肉湯(EE)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βElisa
蒼白鹽八疊球 改良羅氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)5羥色Elisa
疏毛盤多毛孢 阪崎腸桿成套生化鑒定管末端補(bǔ)體復(fù)合物Elisa
蠟樣芽孢桿 腸球肉湯維生DElisa
根瘤 胰膘肉湯基礎(chǔ)1α羥化Elisa
球擬圓酵母 麥康凱瓊脂3號(hào)25羥化Elisa