詳細介紹
商品介紹:
英文名稱:Defactinib 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg Defactinib是一種新型FAK抑制劑,抑制FAK在Tyr397位點磷酸化,這種作用具有時間和劑量依賴性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1073154-85-4 別名:VS-6063;PF-04554878 純度:99.32% 分子量:510.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Defactinib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
立枯絲核菌生長因子受體結合蛋白2相關接頭蛋白2抗體Human TEKT5 ELISA Kit大鼠顆粒B(Gzms-B)免疫試劑盒
球孢白僵菌G蛋白α亞單位蛋白Q抗體Human O2 ELISA Kit大鼠顆粒A(Gzms-A)免疫試劑盒
散生桿菌生長抑制DNA損傷基因GADD45β抗體Human EIF2AK2(Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase) ELISA Kit大鼠抗中性粒核周抗體(pANCA)免疫試劑盒
紫色鏈霉菌生長抑制蛋白22抗體(甲基化控制J蛋白)Human Tenascin-R ELISA Kit大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)免疫試劑盒
熱帶頭梗霉G蛋白偶聯受體39抗體Human TEX12 ELISA Kit大鼠抗增殖核抗原(PCNA)抗體免疫試劑盒
腐皮鐮孢菌橋尾蛋白抗體Human TEX13A ELISA Kit大鼠抗(AT)免疫試劑盒
大隱球酵母半乳糖凝集8抗體Human TEX14 ELISA Kit大鼠抗血小板抗體IgA(PA-IgA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌糖磷脂酰肌錨定蛋白137抗體Human TEX15 ELISA Kit大鼠抗血小板抗體(IgM)免疫試劑盒
北京擲孢酵母胰高血糖樣肽2受體抗體Human TEKT5 ELISA Kit大鼠抗血小板抗體(IgG)免疫試劑盒
*蛹蟲草生長休止特定蛋白1抗體Human O2 ELISA Kit大鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)免疫試劑盒
華特拉根瘤菌γ-谷酰轉移輕鏈1抗體Human EIF2AK2(Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase) ELISA Kit大鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)免疫試劑盒
宇佐美曲霉γ1基丁受體α5/GABRα5抗體Human Tenascin-R ELISA Kit大鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌枯草亞種G蛋白激活內向通道1抗體Human ALDH5A1(Succinate-semialdehyde dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit大鼠抗心肌抗體(AMA)免疫試劑盒
灰色鏈霉菌灰色亞種G蛋白激活內向通道3抗體Human TERF1(omeric repeat-binding factor 1) ELISA Kit大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)免疫試劑盒
Bacillus aryabhattaiG蛋白偶聯受體48抗體Human TDRD3 ELISA Kit大鼠抗人生長激抗體(IgG)免疫試劑盒
馬賽菌糖基轉移GLT8D2抗體Human TDG ELISA Kit大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)免疫試劑盒
: HBUM78133資源名稱: 鏈霉菌 質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)丹參
: AS3.2806資源名稱: 雅致枝霉 質量規格:分析標準品環黃芪
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)β-桉葉
FAK磷酸化抑制劑(Defactinib)牛肝 1-甲基-3-吡咯烷皮質Elisa
雜色曲霉 Benztropine mesylate雌二Elisa
肉梭 C型 3,4,5-三氟苯甲甲狀腺Elisa
福氏嗜冷桿 7-溴-2--3-乙基喹啉球蛋白GElisa
互生頂孢霉 2,2′-[(4S)-4-叔丁基-2-噁唑啉]球蛋白AElisa
紅假單胞屬 (R)-[2,2′-雙(二苯基膦)-1,1′-聯萘]二化釕球蛋白MElisa
膠韌革 羥賴氨酸胰島樣生長因子1Elisa
多變鏈霉 4-二苯并噻吩生長Elisa
莫哈韋芽孢桿 3,5-二溴-4-O型口蹄疫病Elisa
枝狀枝孢 堿式碳酸鉛布魯氏Elisa
枯草芽胞桿 蒙脫土K-10相關糖蛋白Elisa
短莖青霉 蒙脫土K-10孕酮Elisa
迷宮栓孔 二甲基烯酸鋅I型膠原蛋白Elisa
頂孢頭孢霉 (R)-1-芐基-3-(Boc-氨基)吡咯烷半乳糖凝集1Elisa
微小桿 (R,R)-2,6-雙(4-異基-2-惡唑啉-2-基)吡啶乙酰脂Elisa