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H-89(PKA抑制劑)

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更新時間:2022-04-29 08:43:59瀏覽次數:382

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 1mg|5mg
貨號 GOY-01X10244 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
H-89(PKA抑制劑)公司*的產品:SCP3/FITC 熒光標記聯會復合體蛋白3抗體IgGN-苯酰-L-酪氨酯 98%
Secretin/FITC 熒光標記分泌抗體IgGN-(叔丁氧羰) 96%
Secretin receptor/FITC 熒光標記分泌受體抗體IgG卡特縮合劑 98%
SEL1L/FITC 熒光標記SEL1L抗體IgG舒緩激肽三醋鹽 95%
Selenopro

詳細介紹

產品屬性:

中文名稱:H-89(PKA抑制劑)

英文名稱:

產品規格:1mg|5mg

發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研

商品介紹:

英文名稱:

產品規格:1mg|5mg

H89 2HCl 是一種有效的PKA 抑制劑,Ki 為48 nM,作用于PKA 比作用于PKG 選擇性高10倍,比作用于PKC, MLCK,鈣調蛋白激酶II 和酪蛋白激I/II 選擇性高500倍。

細胞生物學研究有以下幾個方面:

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:

①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

②生物膜與細胞器的研究;

③細胞骨架體系的研究;

④細胞增殖及其調控;

⑤細胞分化及其調控;

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細胞的起源與進化;

⑧細胞工程.

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

假黃單胞菌屬癌胚抗原單克抗體(檢測)Human CREB3L2 ELISA Kit山羊腦啡肽(ENK)免疫試劑盒

凍土毛霉癌基因c-Raf抗體Human CREST ELISA Kit山羊免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒

兩歧雙歧桿菌Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體Human CREB1 ELISA Kit山羊免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

球形節桿菌黑色瘤相關抗原抗體Human Claudin 7 ELISA Kit山羊免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

黃孢紫紅菇CD33抗體Human CREB3L2 ELISA Kit山羊粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒

希瓦氏菌*睫狀神經營養因子受體α抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊口蹄疫抗體(FMDV IgM)免疫試劑盒

釀酒酵母CD7抗體Human CKS2 ELISA Kit山羊(Cortisone)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌尾型同源盒轉錄因子2抗體Human CEP44 ELISA Kit山羊抗利尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)免疫試劑盒

短芽孢桿菌CD68抗體Human CEP55 ELISA Kit山羊結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒

東方伊薩酵母緊密連接蛋白1抗體Human CD94 ELISA Kit山羊堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒

尖孢鐮刀菌膜輔蛋白抗體Human  CD9(CD9 antigen) ELISA Kit山羊甲狀腺(T4)免疫試劑盒

委內瑞拉鏈霉菌CXC趨化因子16抗體Human CEP63 ELISA Kit山羊甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒

新疆鹽地桿菌色c氧化IV亞型1抗體Human CEP350 ELISA Kit山羊黃體生成(LH)免疫試劑盒

球孢枝孢1號染色體開放閱讀框227抗體Human CDC14B ELISA Kit山羊氧化(XOD)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌2號染色體開放閱讀框71抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊還原型(GSH)免疫試劑盒

淡青鏈霉菌質膜微囊蛋白-1抗體Human CEP44 ELISA Kit山羊過氧化氫(CAT)免疫試劑盒

酵母菌Saccharomyces│sp. 質量規格:>98%,BRp物質試劑盒雷公藤次堿

木霉Trichoderma│sp. 質量規格:>98%,BRP鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白試劑盒羅漢松樹脂酚

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,BRProminin 2試劑盒雷公藤定堿
H-89(PKA抑制劑)產氣莢膜梭       C型 (S)-(-)-2-氨基-2'-羥基-1,1'-聯萘酪氨酸激BElisa

豬丹絲 1-叔丁氧羰基-4-氨基鹽酸鹽酪氨酸Elisa

不動桿 (S)-(氨甲基)-1-BOC-吡咯烷酪氨酸羥化Elisa

蘇云金芽孢桿肯尼亞亞種 穿心蓮內酯酪酪肽Elisa

變形假單胞 6-鳥嘌呤核苷雷帕霉靶蛋白Elisa

異常漢遜酵母 松香酸類風濕因子Elisa

圓錐節叢孢 (S)-5-溴甲基-2-吡咯烷酮類胰蛋白Elisa

鏈狀鐮孢 (R)-5-溴甲基-2-吡咯烷酮類脂褐Elisa

木糖葡糖酸醋桿 (R)-(+)-2-溴-3-甲基丁酸粒集落激因子Elisa

光帽鱗傘(滑菇) (S)-(+)-2-苯酸粒巨噬集落激因子Elisa

大腸埃希氏 (S,S,S)-2-氮雜雙環[3.3.0]辛烷-3-羧酸芐酯鹽酸鹽趨化因子Elisa

黏液桿 白樺脂酸磷酸二酯Elisa

禿裸鏈霉 (R)-[2,2′-雙(二苯基膦)-1,1′-聯萘]二化釕磷酸果糖激Elisa

水質糞大腸群質控樣品(多管發酵法) (R)-(-)-1,1'-聯-2-萘酚二(三氟甲磺酸酯)磷酸果糖激1Elisa

*蜜環 (R,R)-2,6-雙(4-異基-2-噁唑啉-2-基)吡啶磷酸核糖焦磷酸酰基轉移Elisa 

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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