以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
商品介紹:
Z-LEHD-FMK是一種高效caspase-9的特異的和不可逆的小分子抑制劑。可以抑制由Caspase 9激活導致的細胞凋亡。Z-LEHD-FMK是methyl(4S)-5-[[(2S)-1-[[(3S)-5-fluoro-1-methoxy-1,4-dioxopentan-3-yl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-4-methyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)pentanoyl]amino]-5-oxopentanoate,即C32H43FN6O10,分子量為690.72。 Z-LEHD-FMK采用進口高品質原料分裝配制,濃度為1mM。本產品適用于需要用到Z-LEHD-FMK的各種實驗,請根據不同的實驗需要進行配制和使用,具體請參考相關文獻或實驗指南。 儲存條件:-20℃保存。 有效期:一年。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
Carisoprodol(標準品)英文名稱: Streptozocin柯薩奇病A16型聚合3D包裝25g
Carmustine(標準品)英文名稱: Sulconazle Nitrate睫狀神經營養因子抗體包裝5g
Carvedilol(標準品)英文名稱: Sulconazle Nitrate角蛋白16抗體包裝1g
Chlormadinone Acetate(標準品)英文名稱: Sunitinib base4號染色體開放閱讀框17抗體包裝25g
Ciclesonide(標準品)英文名稱: Sunitinib base質脆性X智力低下蛋白結合蛋白2抗體包裝100mg
Cilostazol(標準品)英文名稱: Sunitinib Malate胸腺基質淋巴生成受體抗體包裝25mg
Citalopram HBr(標準品)英文名稱: Sunitinib Malate角蛋白12抗體包裝100g
Corticosterone(標準品)英文名稱: Suprofen谷半胱γ合成抗體包裝25g
Cortisone acetate(標準品)英文名稱: Tacrolimus /FK506 monohydrate表面趨化因子受體3抗體包裝500g
Cortisone(標準品)英文名稱: Tacrolimus /FK506 monohydrate補體C2抗體包裝25g
Cyclophosphamide(標準品)英文名稱: Tamoxifen Citrate 造血干抗原CD133抗體包裝1g
Cyclosporin A(標準品)英文名稱: Tamoxifen Citrate 內受體抗體包裝5g
Cyproterone acetate(標準品)英文名稱: TandutinibCD20抗體包裝1g
Cytarabine(標準品)英文名稱: TandutinibCD24抗體包裝1g
D(+)-阿拉伯糖(標準品)英文名稱: Teicoplanin 白介2受體a鏈/IL-2RA抗體包裝250mg
易變三角酵母Trigonopsis│variabilis 質量規格:>97%,BR血吸蟲抗原關附;Guan-fu base A
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>99%,BR,用于培養,藥劑造模血吸蟲抗體試劑盒旋復花內酯;Britannilacton
赤桿菌Erythrobacter│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品血吸蟲抗體試劑盒8-香葉草氧基補骨脂;8-Gerany
Caspase 9抑制劑大腸埃希 [(苯硫基)亞甲基]雙(三環己基膦)二氯化釕衣原體IgM抗體Elisa
Deinococcus 2,4-二氯-5-氟苯甲支原體IgM抗體Elisa
哈茨木霉 2-基-4-甲氧基苯甲細粒棘球絳蟲糞抗原Elisa
淡紫擬青霉 6-氨基-1-甲酸叔丁酯抗狂犬病抗體Elisa
鐮刀 1-BOC-6-氨基引唑乙酰Elisa
發酵乳桿 5-溴-3-氯吡-2-共濟失調蛋白3Elisa
球毛殼 3,4,5-三氯溴苯異連蛋白結合蛋白1Elisa
乳桿屬 鹽酸羥N-乙酰--D-氨基葡萄糖苷Elisa
黃色籃狀 3-溴苯酮白蛋白加合物Elisa
果生鏈核盤 1-苯基辛烷異常凝血原Elisa
浸麻類芽胞桿 4-叔丁基-2-氯苯乙酮D蛋白Elisa
草酸青霉 6-溴-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑羧肽Elisa
黃曲霉 5-甲氧基啉抗抗體Elisa
釀酒酵母 2,6-吡啶二羧酸單乙酯脯氨酸羥化1Elisa
腸桿 2-甲巰基-4-氨基嘧啶脯氨酸羥化2Elisa