詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Cisplatin | 50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:Cisplatin 產品規格:50mg Cisplatin 是一種無機的水溶性的鉑配合物,通過形成DNA 交聯劑抑制DNA 合成。 Cisplatin 通過與DNA 相互作用形成DNA 交聯劑誘導細胞毒性,激活多條信號轉導通路, 包括Erk, p53, p73, 和MAPK,其中對激活凋亡影響大。Cisplatin (30 mM)處理HeLa 細胞6小時,顯著激活Erk,持續到隨后的14個小時期間。Cisplatin 還具有有效的抗腫瘤活性,誘導腫瘤細胞死亡。Cisplatin 可引起腎小管上皮細胞(RPTC)發生細胞凋亡,引起細胞收縮,使caspase 3活性提高50倍,磷脂酰絲氨酸外翻提高4倍,染色質凝集和DNA 倍性分別提高5 和15倍。Cisplatin (800 μM)處理RPTC 4個小時,產生細胞壞死的典型特征。 別名:cisplatinum, CDDP, Platinol and Platinol-AQ CAS:15663-27-1 分子式:Cl2H6N2Pt 分子量:300.05 儲存:-20℃,有效期36個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
匍枝根霉原變種NK表面抑制性受體CD94抗體Human CKAP4 ELISA Kit山羊血管內皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒
白僵菌淋巴功能相關抗原-3抗體Human CKS2 ELISA Kit山羊血管緊張轉化(ACE)免疫試劑盒
香菇—五香1號皮膚T虜獲趨化因子抗體Human Claudin 23 ELISA Kit山羊血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
釀酒酵母補體C3a過敏抗體Human CREB1 ELISA Kit山羊血管緊張Ⅰ(ANG-Ⅰ)免疫試劑盒
猴假單胞菌巨噬炎癥蛋白-1γ抗體Human CREB3L2 ELISA Kit山羊褪黑(MT)免疫試劑盒
奇異球菌神經粘附分子配體1抗體Human CREST ELISA Kit山羊銅藍蛋白(CP)免疫試劑盒
盤孢菌8號染色體開放閱讀框30a抗體Human CRMP1 ELISA Kit山羊瘦(LEP)免疫試劑盒
釀酒酵母色P450 11A1抗體Human Claudin 7 ELISA Kit山羊生長激釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒
鍺栓孔菌肉堿棕櫚?;D移1A抗體Human CLEC10A/CD301 ELISA Kit山羊生長激(GH)免疫試劑盒
芽胞桿菌分化周期CDC42蛋白抗體Human CPOX(Coproporphyrinogen oxidase) ELISA Kit山羊狀腺原(T3)免疫試劑盒
中國臺灣根霉磷化分化周期CDC42蛋白抗體Human CIN85 ELISA Kit山羊熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒
蘋果落葉交鏈孢霉環化相關蛋白CAP-2抗體Human CREB1 ELISA Kit山羊固(ALD)免疫試劑盒
假單胞菌屬階段特異性胚胎表面抗原-1抗體Human CKAP4 ELISA Kit山羊前列腺內過氧化物合1(前列腺G / H合和環氧合)(PTGS1)免疫試劑盒
硬結節桿菌20號染色體開放閱讀框202抗體Human CKS2 ELISA Kit山羊前列腺G/H合2(PTGS2)免疫試劑盒
根瘤菌粘膜相關上皮趨化因子28抗體Human Cortactin ELISA Kit山羊前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
梨形毛霉癌胚抗原單克抗體(包被)Human Claudin 23 ELISA Kit山羊皮質(Cortisol)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質量規格:>95%,BRQ熱科克斯體1試劑盒輪環藤堿
刺囊殼Ascotricha│sp. 質量規格:>50%,BSP選擇試劑盒羅紅霉
匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質量規格:>98%,BRP物質受體試劑盒雷公藤吉堿
Cisplatin (DNA交聯劑/細胞凋亡誘導劑)泡盛曲霉 辛可尼定可溶性P選擇Elisa
南游動球 氫化奎尼定 1,4-(2,3-二氮雜萘)二可溶性凋亡相關因子Elisa
大腸埃希氏 氫化奎寧 1,4-(2,3-二氮雜萘)二可溶性凋亡相關因子配體Elisa
香菇 L-(-)-二(對甲酰)可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1Elisa
克魯斯假絲酵母 二苯甲酰基-L-,無水可溶性髓系觸發受體-1Elisa
彎曲假單胞 (-)-乙酸二氫香芹酯可溶性髓系觸發受體-2Elisa
釀酒酵母 醋酸去氫表雄酮可溶性晚期糖基化終末產物受體Elisa
弓形蟲(QHO株) 乙酸柏木酯可溶性間粘附分子1Elisa
酮丁梭 (1S)-(-)-樟腦烷酸可溶性血管內皮粘附分子1Elisa
發酵假絲酵母 膽固硬脂酸酯可溶性血小板內皮粘附分子1Elisa
釀酒酵母 膽固油酸酯可溶性腫瘤壞死因子受體2Elisa
葉生布勒擔子酵母 膽固油酸酯可溶性轉鐵蛋白受體Elisa
大腸埃希氏桿 膽固酯可替寧Elisa
圓錐曲霉 乙酸(1S,2R)-2-[N-芐基-N-(苯基磺酰)氨基]-1-苯基酯[交叉反應用試劑]喹啉酸Elisa
單胞屬 (R)-(+)-2-氨基-2'-羥基-1,1'-聯萘酪氨酸激AElisa