詳細介紹
商品介紹:
用途: 神經HRP示蹤DAB(四甲基聯)顯色。 注意事項: 主要由DAB孵育液、、乙酸鈉緩沖液等組成,染色后呈棕色。 儲存條件:-20℃,避光,12個月 |
產品屬性:
中文名稱:神經HRP示蹤顯色液(DAB法)
英文名稱:
產品規格:50T
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鳶尾黃(標準品)英文名稱: Dyclonine hydrochloride核受體蛋白NR2E1抗體包裝5g
原阿片堿(標準品)英文名稱: SGI1027神經外營養蛋白2抗體包裝250mg
原百部堿(標準品)英文名稱: Bromhexine HCl腦特異性蛋白BPX抗體包裝100mg
原兒茶(標準品)英文名稱: R848,Resiquimod核纖層蛋白A識別因子抗體包裝100mg
原兒茶(標準品)英文名稱: N-(Hydroxymethyl)nicotinamideNOGO相互作用線粒體蛋白1抗體包裝100g
原花青B1(標準品)英文名稱: Pasiniazid神經元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關蛋白抗體包裝25g
原花青B2(標準品)英文名稱: Trepibutone神經元Y連鎖蛋白抗體(兒童自閉癥相關蛋白)包裝5g
原花青(標準品)英文名稱: Trapidil神經連接蛋白2抗體包裝1g
原人參二(標準品)英文名稱: CINAMETIC ACIDNIPA樣蛋白3抗體包裝5g
原人參三(標準品)英文名稱: Orazamide軸突生長誘導因子3抗體包裝100ml
原薯蕷皂苷(標準品)英文名稱: 3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE軸突蛋白3抗體包裝25ml
原蘇木B(標準品)英文名稱: Dequalinium chloride1號染色體開放閱讀框63抗體包裝1g
原偽金絲桃英文名稱: BERBERINE ACID SULFATE神經元特異性蛋白家族成員2抗體包裝100g
遠志(標準品)英文名稱: Domiphen bromide神經前體發育下調蛋白4抗體包裝25g
遠志口山;遠志山III(標準品)英文名稱: Ulipristal acetate泛結合E2F抗體包裝25g
海綿假單胞菌Pseudomonas│pachastrellae 質量規格:>98%狀腺激免疫球蛋白試劑盒長春質堿;Catharanthine
ATCC10382資源名稱: 抗生鏈霉菌 質量規格:>99%,BR狀旁腺激相關蛋白試劑盒白果雙黃;Bilobetin
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:HPLC>98%,標準品狀旁腺激1受體試劑盒3-表熊果;3-Epiursolic
神經HRP示蹤顯色液(DAB法)酵母 2-苯并噻唑-6-甲酸乙酯轉化生長因子β1Elisa
緊密青霉 4-氨基-3,5-二苯轉化生長因子β2Elisa
枯草芽孢桿 (芐氧羰基)三苯基溴化轉化生長因子β3Elisa
葡萄座腔 4-氨基-1,2,5-噁二唑-3-甲酸轉錄因子Elisa
釀酒酵母 三-(4-叔丁基苯基)磷酸酯轉鐵蛋白Elisa
單色革蓋 D-3-(1-萘基)-氨酸轉鐵蛋白受體Elisa
鹽古桿 奈帕芬轉移因子Elisa
蒂莫內馬賽 2-氨基-3-苯甲酰基-alpha-(甲硫基)苯乙酰總β淀粉樣蛋白Elisa
黑芝 2-甲基-2-基-1,3-烷二總膽固Elisa
枯草芽孢桿 三季戊四總膽紅Elisa
米曲霉 3-溴-4-氟苯甲酰溴總膽汁酸Elisa
大豆慢生根瘤 雙芬酸二乙鹽總蛋白Elisa
木拉克德克斯酵母 5-異基吡唑-3-甲酸乙酯總抗氧化能力Elisa
大腸埃希氏噬體 n-甲氧基-n-甲基乙酰總鐵結合力Elisa
球孢白僵 R-N-Cbz-3-甲酸總脂肪酸Elisa