詳細介紹
商品介紹:
Z-IETD-FMK是一種高效可逆的caspase-8的小分子抑制劑。可以抑制由Caspase 8激活導致的細胞凋亡。Z-IETD-FMK分子量為654.7。 Z-IETD-FMK采用進口高品質(zhì)原料分裝配制,濃度為5mM。本產(chǎn)品適用于需要用到Z-IETD-FMK的各種實驗,請根據(jù)不同的實驗需要進行配制和使用,具體請參考相關文獻或實驗指南。 儲存條件:-20℃保存。 有效期:一年。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
200μl | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Androstenedione(標準品)英文名稱: Salcitonin Acetate(Salmon Calcitonin)1號染色體開放閱讀框41抗體包裝100ml
Argatroban(標準品)英文名稱: Saracatinib(AZD0530)1號染色體開放閱讀框144抗體包裝500ml
Atipamezole HCl(標準品)英文名稱: Secnidazole4號染色體開放閱讀框3抗體包裝1g
Atomoxetine HCl(標準品)英文名稱: Secnidazole組織蛋白S抗體包裝1g
Atorvastatin calcium(標準品)英文名稱: Sequoyitol死亡誘導蛋白抗體包裝5g
Bambuterol HCl(標準品)英文名稱: Sermorelin Acetate前列腺雄激抑制信號蛋白1抗體包裝1g
Beclomethasone Dipropionate...英文名稱: Silver Sulfadiazine磷化心肌肌鈣蛋白抗體包裝5g
Betamethasone Valerate(標準品)英文名稱: Silver Sulfadiazine脊髓灰質(zhì)炎受體相關蛋白1抗體包裝1g
Betamethasone(標準品)英文名稱: Simvastatin19號染色體開放閱讀框73抗體包裝100g
Bimatoprost(標準品)英文名稱: Simvastatin整合αM抗體Integrin αM包裝500g
Bleomycin A5 Hydrochloride ...英文名稱: Combretastatin A4 disodium phosphate (CA4P)軸突蛋白4/少突膠質(zhì)抗體包裝100g
Bortezomib(標準品)英文名稱: Sisomicin Sulfate軸突相關CNTP2蛋白抗體(少突膠質(zhì))包裝25g
Budesonide(標準品)英文名稱: Sisomicin Sulfate酪蛋白激δ1抗體包裝5g
Candesartan cilexetil(標準品)英文名稱: Somatostatin Acetate活化白粘附分子抗體包裝100g
Carbamazepine(標準品)英文名稱: Streptozocin1號染色體開放閱讀框191抗體包裝25g
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:純度>99%血纖肽/纖維蛋白肽A試劑盒鹽小檗;BerbaMine dihy
: HBUM82521資源名稱: 金黑小單孢菌 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR血纖蛋白原γ鏈試劑盒新西蘭牡荊苷;Vicenin-2
木霉屬Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:效價測定血纖蛋白試劑盒纈草;Homobaldrinal
Caspase 8抑制劑副豬嗜血桿 3-溴-2,6-二氟甲苯成纖維特異蛋白1Elisa
意大利青霉 2,3-二氟-6-甲氧基苯甲分揀連接蛋白7Elisa
短芽孢桿 溴乙酰氯抗凝血Elisa
杏鮑菇 6-氨基糖精磷酸化糖皮質(zhì)受體Elisa
鴨疫里氏桿 3-(4-甲氧苯基)-3-羰基酸甲酯蛋白磷酸1調(diào)控Elisa
林生地霉 1-芐基-4-甲瘦分泌型受體Elisa
水黏結桿 2-溴-3-酚游離蛋白SElisa
江西彎曲嗜酸 間氯甲酸叔丁酯總蛋白sElisa
Marisediminicola 己酸二乙氨基乙酯檸檬酸鹽總蛋白sElisa
阿魏側耳 亞異基二酸二甲酯血小板生成Elisa
太平洋大洋桿狀 4-氯苯甲酰乙酸甲酯鈣結合蛋白Elisa
猴假單胞 3,4-亞甲基二氧芐肼過氧化物1Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 2,4,6-三氟苯乙抗突變型瓜氨酸化波形蛋白抗體Elisa
匍枝根霉 2,4-二甲基-3-吡咯羧酸乙酯血小板衍化生長因子CCElisa
皺褶假絲酵母 3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸乙酯C1q腫瘤壞死因子相關蛋白4Elisa