詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:Syk抑制劑(GS-9973)
英文名稱:GS-9973
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:GS-9973 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg GS-9973是一種選擇性的Syk抑制劑,IC50值為7.7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1229208-44-9 別名:Entospletinib 純度:99.23% 分子量:411.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
啤酒神金黃桿菌葡萄糖合成2抗體Human THAP2 ELISA Kit大鼠磷蛋白關聯鞘糖脂微區1(PAG1)免疫試劑盒
盾殼霉谷草轉2抗體Human THG1L ELISA Kit大鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌葡萄糖-6磷脫氫抗體Human THEM4 ELISA Kit大鼠淋巴功能相關抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒
黑曲霉葡萄糖轉運蛋白5抗體Human THNSL2 ELISA Kit大鼠亮酰基肽(LAP)免疫試劑盒
白僵菌葡萄糖合成1抗體Human THOC1 ELISA Kit大鼠粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌G蛋白修補結構域蛋白8抗體Human TGIF2LX ELISA Kit大鼠粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒
木賊鐮孢甘油激3抗體Human THOC2 ELISA Kit大鼠類固5α還原1(SRD5A1)免疫試劑盒
唾液乳桿菌高爾基體磷蛋白3樣蛋白抗體Human TGM4 ELISA Kit大鼠類風濕因子(RF)免疫試劑盒
泡囊短波單胞菌磷化谷受體1抗體Human TFDP2 ELISA Kit大鼠酪羥化(TH)免疫試劑盒
康氏木霉G蛋白修補結構域蛋白1抗體Human TFDP1 ELISA Kit大鼠酪蛋白激JAK3(Jak3)免疫試劑盒
pDC316磷化G蛋白偶聯受體激相互作用蛋白1抗體Human SNX9(Sorting nexin-9) ELISA Kit大鼠克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
云芝磷化G蛋白偶聯受體激相互作用蛋白1Human TFE3 ELISA Kit大鼠可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導劑(sTWEAK)免疫試劑盒
灰樹花孔菌葡萄糖激調節蛋白抗體Human TFEB ELISA Kit大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)免疫試劑盒
土壤薄層菌GTP結合蛋白10抗體Human TFEC ELISA Kit大鼠可溶性血小板內皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒
總狀毛霉磷化Ras GTP活化蛋白結合蛋白1抗體Human TFIP11 ELISA Kit大鼠可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)免疫試劑盒
Cerrena unicolorRas GTP活化蛋白結合蛋白1抗體Human TFPT ELISA Kit大鼠可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒
鮭色諾卡氏菌Nocardia│salmonicolor 質量規格:for HPLC,≥99.0%(T)異蓮心堿
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規格:for HPLC,≥99.0%綿馬ABA
秦氏蜜環菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 質量規格:離子對色譜級大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖苷
Syk抑制劑(GS-9973)香魏菇(側耳) 化銩(III) 六水合物γ氨基丁酸Elisa
雞腿菇(川雞3號) 5-羥基-2-甲基線粒體酮戊二酸脫氫Elisa
漆柄小孔 對三氟甲氧基苯肼鹽酸鹽NADH脫氫Elisa
釀酒酵母 磷酸磷脂AElisa
金色產色鏈霉 鄰乙二全酯Elisa
小單孢 烯酸異癸酯卵黃蛋白原受體Elisa
布氏正青霉 4-溴-3-氟苯煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸Elisa
香菇 4-溴-3-氟苯甲可溶性蛋白Elisa
靈芝 4-芐氧基-3-氟苯酸過氧化氫Elisa
蘇云金芽胞桿 6-乙酰基-2(3H)-苯并噻唑酮可溶性蛋白Elisa
銅生金球 分散橙37色氨酸羥化Elisa
枯草芽孢桿 (R)-(+)-3-(二甲氨基)吡咯烷乙酰Elisa
紫棕炭團 (S)-1-Boc-3-基吡咯烷6-磷酸葡萄糖脫氫Elisa
解淀粉芽孢桿 (R)-1-Boc-3-基吡咯烷ATP結合盒轉運蛋白Elisa
pET-44c 異烯溴化鎂一磷酸腺苷Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)