產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HDAC3抑制劑(RGFP966)
英文名稱:RGFP966
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
RGFP966是一種選擇性的HDAC3抑制劑,IC50為80nM,濃度高達(dá)15μM時(shí),對(duì)其他HDAC也沒作用效果。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1357389-11-7 純度:99.32% 分子量:362.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
頭狀絲孢酵母Iroquois同源蛋白5抗體Human RFK ELISA Kit總蛋白C(TPC)
膠孢鐮孢整合αE抗體Integrin αEHuman REEP5 ELISA Kit總膽汁(TBA)
淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種間粘附分子-2抗體Human REEP2 ELISA Kit自然殺傷(NK)
醬油曲霉整合β3抗體Human REEP6 ELISA Kit自然抗性相關(guān)巨噬蛋白2(NRAMP-2)
雜色曲霉整合α4抗體Human RELT ELISA Kit自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1(NRAMP-1)
豬丹絲菌白介15抗體Human RGS4 ELISA Kit樁蛋白(Pax)
假單胞菌屬磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Human REM2 ELISA Kit轉(zhuǎn)移因子(TF)
平菇新農(nóng)1號(hào)一氧化氮合成-2抗體(誘導(dǎo)型)Human RFTN1 ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)
沙針草狀孢菌干擾α6抗體Human RFX3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)
灰紅鏈霉菌整合β2/Integrin β2抗體Human RFWD3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)
茄拉爾氏菌抑制A/Inhibin βA抗體Human RFTN2 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子SOX-5(SOX5)
膠質(zhì)芽孢桿菌*胰島受體底物-3抗體Human RFX5 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子SOX-4(SOX4)
釀酒酵母胰島受體底物p53蛋白抗體Human RFXAP ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子1(AP-1)
紅法夫酵母*胰島受體底物-1抗體Human RGS1(Regulator of G-protein signaling 1) ELISA Kit轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白(TTR)
布萊克威爾假絲酵母胰島受體底物-2抗體Human RGR ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長因子-β誘導(dǎo)蛋白IG-H3(TGFBI/BIGH3)
豬丹絲菌胰島受體底物-4抗體Human RGMA ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長因子β受體3(TGFBR3)
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)原蘇木B
稻梨孢(稻瘟病菌)Pyricularia│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)龍血B
大肥菇Agaricus│bitorquis 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)蔓荊子黃
HDAC3抑制劑(RGFP966)白僵 N,N-二甲基間羥基苯一氧化氮Elisa
玫瑰庫克氏 2-吡啶甲酸一氧化氮合成Elisa
葉居 2-吡羧酸胰島Elisa
茶褐針層孔 叔丁基 2,2,2-三乙酰亞酯胰島樣生長因子1Elisa
豕鏈球 (1R,2S)-(-)-反-2-苯基-1-環(huán)己胰高血糖Elisa
擬卵蓋鵝膏 苯酸乙酰羧化Elisa
大腸埃希氏 4-甲氧基苯磺酰異檸檬酸裂解Elisa
鐮刀 4-羥基苯磺酸水合物抑制BElisa
三葉草根瘤 4-羥基苯磺酸水合物硬脂酰去飽和Elisa
Chitinophaga pinensis 4-苯磺酸水合物硬脂酰去飽和1Elisa
墨西哥假黃單胞 2'-氟-4'-羥基苯乙酮游離脂肪酸Elisa
膠孢 4-苯磺酰誘導(dǎo)型NO合Elisa
居成團(tuán)玫瑰變色 4-甲硫基苯酸原纖維蛋白-1Elisa
豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS24 對(duì)叔丁苯孕酮Elisa
栗酒裂殖酵母 2-氨基-3-溴-4-載脂蛋白B100Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)