詳細介紹
商品介紹:
用途: 神經HRP示蹤TMB(四甲基聯)顯色,反應較DAB法靈敏。 注意事項: 主要由TMB孵育液、、乙酸鈉緩沖液等組成,染色后呈藍色。 儲存條件:4℃,避光,12個月 |
產品屬性:
中文名稱:神經HRP示蹤顯色液(TMB法)
英文名稱:
產品規格:50T
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
柚皮(標準品)英文名稱: 1,8-Dihydroxyanthraquinone胚胎干關鍵蛋白抗體包裝25ml
右旋蛇菰寧英文名稱: Chlorhexidine hydrochloride核小體組裝蛋白1抗體包裝500ml
右旋延胡索乙(標準品)英文名稱: Methoxyphenamine HClN-鈣粘附分子抗體包裝100g
幼枝含斷氧化馬錢子甙(標準品)英文名稱: Potassium guaiacolsulfonate hemihydrate核受體輔助抑制因子1抗體包裝25g
余甘子(標準品)英文名稱: Propyl gallate腎小球粘附分子受體抗體包裝100g
魚腥草(標準品)英文名稱: Chlormezanone巢蛋白/神經上皮干蛋白抗體包裝25g
羽扇豆(標準品)英文名稱: Calcium hydrogenphosphate dihydrate巢蛋白/神經上皮干蛋白抗體包裝5g
羽扇豆鹼(標準品)英文名稱: Sulfamethazine蛋白激錨定蛋白抗體包裝1g
玉米須(標準品)英文名稱: Sulfaguanidine絲或半胱蛋白解抑制蛋白1抗體包裝5g
玉葉金花(標準品)英文名稱: Fenbufen黑色瘤硫軟骨蛋白多糖抗體包裝100ml
郁金(溫郁金)(標準品)英文名稱: Troxerutin突觸粘附分子3抗體包裝100g
預知子(三葉木通)(標準品)英文名稱: Diprophylline跨膜硫軟骨蛋白聚糖C抗體包裝25g
愈創木英文名稱: Bendazol hydrochloride神經腫瘤Nova1抗原抗體包裝500g
鳶尾苷(標準品)英文名稱: Chloroquine diphosphateB淋巴鏈接激活蛋白抗體包裝1g
鳶尾黃-7-O-木糖基葡萄糖苷英文名稱: Promethazine Hydrochloride中性鞘磷脂2抗體包裝250mg
: C.DAi-426資源名稱: 亞利桑那沙門氏菌 質量規格:>99%狀腺激受體β試劑盒草烏;Bulleyaconitine
皮落青霉Penicillium│solitum var. crustosum (Thom) Bridge D. Hawksw. 質量規格:HPLC>98%,標準品狀腺過氧化物試劑盒長春新堿;Vincristine
阿拉斯加鞘盒菌Sphingopyxis│alaskensis 質量規格:>99%狀腺非肽激抗體試劑盒長春花堿;Vinblastine
神經HRP示蹤顯色液(TMB法)球形賴氨酸芽孢桿 5-溴-6-煙酸甲酯中性膽固Elisa
滑假絲酵母 2-氨基-1-(2,4-二氟苯基)乙酮鹽酸鹽中性粒彈性蛋白Elisa
波蘭青霉 2-(甲基)-1-甲基-1H-咪唑鹽酸鹽中性粒堿性磷酸Elisa
緩慢葡萄球 3-溴-2-氟中性粒明膠相關脂質運載蛋白Elisa
釀酒酵母 3-氨基-5-氟中性內肽;腦啡肽Elisa
植物乳桿 鹽酸特比萘酚腫瘤壞死因子αElisa
赤曲霉 2,5-二-3-腫瘤壞死因子βElisa
黑烏霉 2-溴三苯腫瘤壞死因子γElisa
煙色毛霉 噻螨酮腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠElisa
嗜熱鏈球 2-溴-4-(三氟甲基)嘧啶腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡElisa
Aquibacillus halophilus 全氟十二烷基三硅烷腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體Elisa
角鱗灰鵝膏 四-(4-氨基苯)乙烯周期蛋白G2Elisa
鐮孢 三辛基氧化磷周生長因子Elisa
泡囊短波單胞 4-氟-3-甲氧基轉化生長因子αElisa
溜曲霉 2-氟-6-甲氧基苯酸轉化生長因子βElisa