詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
IWP-2 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
IWP-2抑制Wnt加工和分泌,IC50為27nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:686770-61-6 純度:97.40% 分子量:466.6 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
芽胞桿菌ATCC 9372;(曾用名:枯草芽胞桿菌黑色變種)單酰甘油脂肪抗體Human SESN1(Sestrin-1) ELISA Kit利尿肽(KP)
枯草芽孢桿菌致癌基因n-Myc抗體Human GHRH(Somatoliberin) ELISA Kit冷誘導RNA結合蛋白(CIRBP)
戊糖乳桿菌多藥耐藥相關蛋白3抗體Human CGB(CGβ(Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit) ELISA Kit冷球蛋白(CG)
枯草芽孢桿菌線粒體轉錄終止因子1抗體Human TAGLN2(Transgelin-2) ELISA Kit類粘蛋白2(ORM2)
拱狀靈芝蛋白激MST2抗體Human SFRP2(Secreted frizzled-related protein 2) ELISA Kit類粘蛋白(ORM)
*灰葡萄孢DNA結合蛋白C抗體Human IFNGR1(Interferon gamma receptor 1) ELISA Kit類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)
Chitinophagaceae sp.胃粘液抗體Human SULF2(Extracellular sulfatase Sulf-2) ELISA Kit類肌腱蛋白c(TNC)
巴氏醋桿菌巴氏亞種促黑激γ抗體Human CSTA(Cystatin-A) ELISA Kit類肌腱蛋白(TN)
阪崎腸桿菌抗體Human NAA20(N-alpha-acetyltransferase 20) ELISA Kit類固抗體(SCA)
類干酪乳桿菌結腸癌相關蛋白MIC1抗體Human HBA1(Hemoglobin subunit alpha) ELISA Kit類風濕因子(RF)
囊狀匐柄霉組織相容性復合體β抗體Human STEAP1(Metalloreductase STEAP1) ELISA Kit類白抗原G(HLA-G)
香菇Myc基因肺癌相關蛋白抗體Human HIF1AN(Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor) ELISA Kit類白抗原E(HLA-E)
蘇云金芽孢桿菌糖蛋白gp330抗體Human TAGLN2(Transgelin-2) ELISA Kit類白抗原C(HLA-C)
人參土地桿菌磷化肌原調節蛋白抗體Human SESN1(Sestrin-1) ELISA Kit類白抗原B27(HLA-B27)
Rhizobium vitis造血祖激1抗體Human GHRH(Somatoliberin) ELISA Kit類白抗原A(HLA-A)
大腸埃希氏桿菌絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human PDE4B(cAMP-specific 3′,5′-cyclic phosphodiesterase 4B) ELISA Kit雷帕霉靶蛋白(mTOR)
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,BR楊苷
型副傷寒沙門氏菌Salmonella│paratyphiA 質量規格:>98%,BR酚
木霉Trichoderma│sp. 質量規格:BR,日本進口分裝麝香
Wnt加工和分泌抑制劑(IWP-2)大腸埃希氏 對甲苯磺酰甲基異促黃體Elisa
竹針孢座囊 呋喃酮促卵泡Elisa
*血紅鉚釘菇(又名松傘) 2--4,6-二氟苯促性腺釋放Elisa
油桐盾殼霉 2′,4′-二氟苯乙酮催乳Elisa
柔毛鏈霉 4-氟-2-睪酮Elisa
尖孢鐮刀 3-羧基環丁骨保護Elisa
秀珍菇 3-氟鄰苯二酚骨鈣Elisa
蠟狀芽孢桿 Piroxicam骨堿性磷酸Elisa
蘇云金芽孢桿松蠋亞種 2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶敏感性脂肪Elisa
鏈霉鏈霉 2',3'-異叉鳥苷甲狀腺Elisa
枯草芽孢桿 2',3'-異叉腺苷磷酸烯式酮酸羧激Elisa
膠孢鐮孢 N-丁基苯磺酰球蛋白AElisa
蘇云金芽孢桿 二甲氨基乙縮二乙球蛋白GElisa
釀酒酵母 2,5-二-3-乙酰基噻吩球蛋白MElisa
卵形巴貝斯蟲(文縣株) D(+)巖藻糖蘋果酸脫氫Elisa