詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:Caspase抑制劑Z-VAD-FMK(20mM)
英文名稱:
產品規格:100μl
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Caspase抑制劑Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor Z-VAD-FMK)是一種不可逆的Caspase廣譜抑制劑,可以穿透細胞膜的泛Caspase抑制劑(Cell permeable pan caspase inhibitor),可以抑制由Caspase 激活導致的細胞凋亡。 Caspase抑制劑Z-VAD-FMK分子式為Z-Val-Ala-Asp-CH2F,C21H28FN3O7,分子量為453.5,純度>99%。 Caspase抑制劑Z-VAD-FMK是一種常用的細胞凋亡抑制劑,常用于觀察特定的細胞凋亡是否通過Caspase 激活來介導。Caspase抑制劑Z-VAD-FMK 不僅可以穿透細胞膜抑制細胞內的Caspase,也可以用于抑制體外純化或粗抽提的Caspase。 本Caspase抑制劑Z-VAD-FMK配制在DMSO中,可以直接使用。 儲存條件:-20℃保存。 有效期:一年。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
4-[2-(5-基吡-2-酰基)乙基]磺酰...英文名稱: Quetiapine Fumarate20號染色體開放閱讀框194抗體包裝250g
4-[2-(5--2-氧基酰)-乙基]-磺...英文名稱: Quetiapine Fumarate4號染色體開放閱讀框32抗體包裝50g
4-基安替比林(標準品)英文名稱: Raltegravir K5號染色體開放閱讀框20抗體包裝100g
4-羥基(標準品)英文名稱: Raltegravir胱抑D/半胱蛋白抑制劑D抗體包裝25g
4-羥基芐;對羥基(標準品)英文名稱: Rapamycin(Sirolimus)胱抑8/半胱蛋白抑制劑8抗體包裝10g
4-羥基間二(標準品)英文名稱: Rapamycin(Sirolimus)胱抑9/半胱蛋白抑制劑9抗體包裝50g
4-異丁基(標準品)英文名稱: Rasagiline Mesylate胱抑S/半胱蛋白抑制劑S抗體包裝1g
4-[2-(5--2-氧基酰)-乙基]-磺...英文名稱: Resveratrol煙堿型乙酰受體α3抗體包裝25g
4-差向四環(標準品)英文名稱: Resveratrol3號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g
5'-脫氧-5-胞苷(5’-DFCR)(標準品)英文名稱: Retigabine Base3號染色體開放閱讀框39抗體包裝25g
5-基楊,美沙拉秦(標準品)英文名稱: Retigabine3號染色體開放閱讀框59抗體包裝5g
5-基-2,4-戊二烯(標準品)英文名稱: Ribavirin5號染色體開放閱讀框51抗體包裝1g
5-氮胞苷/阿扎胞苷(標準品)英文名稱: Ribavirin3號染色體開放閱讀框70抗體包裝5g
5-基蜂蜜曲霉(標準品)英文名稱: Ribostamycin Sulfate2號染色體開放閱讀框68抗體包裝1g
5-羥基色(標準品)英文名稱: Rifabutin 2號染色體開放閱讀框47抗體包裝1g
酵母菌Saccharomyces│sp. 質量規格:>99%,BR,可用于培養血小板膜糖蛋白Ⅳ試劑盒異甘草;Isoliquiritigen
原小單孢菌屬菌種Promicromonospora│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa試劑盒柚皮苷;Naringin
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>99%,BR血小板激活因子乙酰解2,質試劑盒延胡索乙;Tetrahydropalm
Caspase抑制劑Z-VAD-FMK(20mM)臭曲霉 2,3,6-三氟芐生物羧化Elisa
熱帶假絲酵母 2-溴-3-羥基-6-甲基吡啶音猬因子Elisa
微紅微球屬 4-甲氧基-2-硝基-苯甲蓋他病Elisa
白僵 1-苯基-1,2,3,4-四氫異喹啉Salusinβ蛋白Elisa
地衣芽孢桿 6-硝基-1,2-苯并異噻唑啉-3-酮 1,1-二氧化物可溶性因子受體Elisa
阿舒假囊酵母 N-乙酰基-3-甲β微球蛋白Elisa
米曲霉 4-三糖類抗原50Elisa
泡盛曲霉變種 5-硝基噻吩-2-羧酸糖類抗原199Elisa
植物乳桿 3-芐氧基苯甲酰肼糖類抗原153Elisa
核盤 硅化鎂糖類抗原242Elisa
溶血不動桿 順-6-壬烯糖類抗原724Elisa
短穩桿 1-環戊烯基乙prestin 蛋白Elisa
異常漢遜酵母 2,3-二氫苯并呋喃-5-酸番茄紅Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-2-羥基甲酯色P45011B1Elisa
黑根霉 6-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉色P45011B2Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)