詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
RepSox | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:RepSox 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg RepSox是一種有效的選擇性的TGFβR-1/ALK5抑制劑,抑制ALK5自磷酸化,IC50為4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:446859-33-2 別名:E-616452;SJN 2511 純度:99.94% 分子量:287.32 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
北京芽孢桿菌葡萄糖氧化抗體Human TIP47 ELISA Kit大鼠流行性出血熱IgG抗體免疫試劑盒
米曲霉葡萄糖苷2β/Glucosidase IIβ抗體Human TIMM13 ELISA Kit大鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)免疫試劑盒
類諾卡氏菌谷脫氫2抗體Human TIP30 ELISA Kit大鼠磷脂A2(PL-A2)免疫試劑盒
蠅鵝膏菌磷化谷受體1抗體Human TIPIN ELISA Kit大鼠磷烯式羧激(PCK)免疫試劑盒
泡囊短波單胞菌γ-谷酰水解抗體Human TIMM17A ELISA Kit大鼠磷激活谷酰(PAG)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌谷酰-脯酰-tRNA合成抗體Human TIMM17B ELISA Kit大鼠磷肌3激(PI3K)免疫試劑盒
Pseudarthrobacter谷氧還蛋白2抗體Human FLNC(Filamin-C) ELISA Kit大鼠磷化乙酰羧化(pACCase)免疫試劑盒
弗雷德里克斯堡假單胞菌谷氧還蛋白5抗體Human TJAP1 ELISA Kit大鼠磷化胰島受體(pISR1)免疫試劑盒
大腸桿菌過氧化2抗體Human TIMM22 ELISA Kit大鼠磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)免疫試劑盒
康氏木霉過氧化7抗體Human THNSL2 ELISA Kit大鼠磷化外信號調節激(pERK)免疫試劑盒
蒼白鹽八疊球菌S轉移α1抗體Human TGM4 ELISA Kit大鼠磷化糖原合成激3(pGSK-3)免疫試劑盒
根瘤菌S轉移κ抗體Human TGIF2LX ELISA Kit大鼠磷化核因子-κB(p-NF-κB)免疫試劑盒
熒光假單胞菌半乳糖激1抗體Human THOC2 ELISA Kit大鼠磷化縫隙連接蛋白α1,43kDa(phosphorylated GJA1)免疫試劑盒
運動節桿菌糖原蛋白2抗體Human THOC1 ELISA Kit大鼠磷化蛋白激C(P-PKC)免疫試劑盒
釀酒酵母磷半乳糖尿苷轉移1抗體Human THEM2 ELISA Kit大鼠磷化蛋白激B(P-PKB)免疫試劑盒
皮狀絲孢酵母糖原蛋白1抗體Human SIRT5(NAD-dependent deacetylase sirtuin-5) ELISA Kit大鼠磷化Tau蛋白(pMAPT/pTAU)免疫試劑盒
小單孢菌Micromonospora│sp. 質量規格:柱層析用,10-30目甘草查爾C
空腸彎曲桿菌Campylobacter│jejuni 質量規格:for HPLC, ≥99%(T)甘草查爾B
檸檬假交替單胞菌Pseudoalteromonas│citrea 質量規格:農殘級甘草查爾A
TGFβR-1和ALK5抑制劑(RepSox)異常漢遜酵母 代三吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽蛋氨酸合成Elisa
枯草芽孢桿 8-溴-2'-脫氧鳥苷3-羥酰脫氫Elisa
球形芽胞桿 5-氨基-2-并噻唑ATPElisa
多主葡萄殼 丁基三苯基化膦膜結合型前列腺E合成1Elisa
土曲霉 2-氨基-4-吡啶羧酸前列腺E合成1Elisa
伊氏利斯特氏 N,N-二基磺酰精氨基琥珀酸合成Elisa
白色球形孢囊 Boc-O-芐基-L-蘇氨精氨琥珀酸裂解Elisa
克魯弗酵母 堿式乙酸鉛半胱氨酰氨肽Elisa
東方伊薩酵母 堿式乙酸鉛鈣調磷酸Elisa
碳樣小單孢 Boc-Glutaminol天蠶BElisa
季也蒙邁耶氏酵母 堿式乙酸鉛谷氨酰Elisa
矩圓黑盤孢 Fmoc-Glu(OAll)-OH晶體蛋白αElisa
沙氏倚囊霉 2-(三氟甲基)苯硫酚晶體蛋白βElisa
可可豆醋桿 3-酸糖原Elisa
短小芽孢桿 酸鋅透明質酸Elisa