商品介紹:
英文名稱:Vismodegib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg Vismodegib是一種可hedgehog抑制劑,IC50值為3nM;同時(shí)可抑制P-gp和ABCG2的活性,IC50值分別為3.0μM和1.4μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:879085-55-9 別名:GDC-0449 純度:99.91% 分子量:421.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
金黃色葡萄球菌金黃亞種酪蛋白激受體A10抗體Human LCP1 (Plastin-2) ELISA KIT人5羥二十碳四烯(5-HETE)免疫試劑盒
腸膜明串珠菌腸道病71型/手足口病病抗體Human LIG1 (DNA ligase 1) ELISA KIT人5核苷(5-NT)免疫試劑盒
假單胞菌轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體Human LCP2 (Lymphocyte cytosolic protein 2) ELISA KIT人5'-AMP活化蛋白激α-2催化亞基(PRKAA2)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌酪蛋白激B3抗體Human SEMG2(Semenogelin-2) ELISA Kit人Ⅳ型前膠原基末端肽(PⅣNP)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌磷化酪蛋白激受體B1+B2抗體Human POMC(Pro-opiomelanocortin) ELISA Kit人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒
農(nóng)球菌酪蛋白激受體B1+B2+B3+B4抗體Human LYRM1 (LYR motif-containing protein 1) ELISA KIT人4-羥基壬烯(HNE)免疫試劑盒
溶桿菌空通氣孔樣蛋白2抗體Human KMO(Kynurenine 3-monooxygenase) ELISA Kit人40S核糖體蛋白S19(RPS19)免疫試劑盒
微白黃鏈霉菌同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體Human LMCD1 (LIM and cysteine-rich domains protein 1) ELISA KIT人Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)免疫試劑盒
糞腸球菌磷化外信號調(diào)節(jié)激5抗體Human LRRK1 (Leucine-rich repeat serine/threonine-protein kinase 1) ELISA KIT人Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒
平菇CD39樣蛋白1抗體Human LCT (Lactase-phlorizin hydrolase) ELISA KIT人Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒
鏈霉菌真核翻譯起始因子5抗體Human LRGUK (Leucine-rich repeat and guanylate kinase domain-containing protein) ELISA KIT人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)免疫試劑盒
大麗輪枝霉早期B淋巴因子2抗體Human LACE1 (Lactation elevated protein 1) ELISA KIT人Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒
魯氏接合酵母ELAVL2蛋白抗體Human TFCP2(Alpha-globin transcription factor CP2) ELISA Kit人Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體Human IPP (Actin-binding protein IPP) ELISA KIT人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒
白鮑魚菇同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體Human LBX1 (Transcription factor LBX1) ELISA KIT人3氧代5α類固4脫氫2(SRD5A2)免疫試劑盒
米曲霉轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體Human PTN(Pleiotrophin) ELISA Kit人3型1-磷鞘受體(S1P3)免疫試劑盒
: ATCC10231資源名稱: 白色假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品琥珀
: FRI2008042資源名稱: 嗜蟲沙雷氏菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品三油甘油酯
泡囊側(cè)耳Pleurotus│cystidiosus 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%(HPLC),分析標(biāo)準(zhǔn)品乙酰楊
hedgehog抑制劑(Vismodegib)日本曲霉 2-羥基-3-三氟瘟抗體Elisa
乳桿屬 二烯酸新戊二酯鐵蛋白Elisa
檸條根瘤 3-氨基-4-酸二磷酸腺苷Elisa
紅色鏈霉 4-(二氟甲氧基)苯三磷酸腺苷Elisa
蘋果黑腐皮殼 3-(二氟甲氧基)苯腸蛋白Elisa
梅奇酵母屬 3-(二氟甲氧基)腸蛋白Elisa
豬細(xì)小病 2-(二氟甲氧基)苯糖原合成Elisa
釀酒酵母 硫化亞銅糖原合成激Elisa
枯草芽孢桿 雙羥萘酸噻嘧啶小鵝瘟病抗體Elisa
膠凍樣類芽孢桿 5-溴啉腫瘤壞死因子βElisa
粉狀畢赤酵母 1,2,3,4-四氫-1-萘白介1Elisa
需鈉弧 4-甲基芐乙酯一氧化氮Elisa
異常漢遜酵母 4,4'-二羧基二苯氧化Elisa
枯草芽孢桿 1-芐基-3-羥基-1H-吲唑促性腺抑制Elisa
蠟狀芽孢桿 L-生物喋呤P4Elisa