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線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法

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更新時間:2022-04-14 14:45:10瀏覽次數:419

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50管/48樣
貨號 GOY-01S6586 主要用途 公司產品僅供科研
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法正在出售的商品:羊抗小鼠IgG三氟化-乙絡合物 Boron Trifluoride - Ethyl Ether Complex >98.0%(W)Human
驢抗羊IgG乙龍腦酯(含約20%的乙異龍腦酯) Bornyl Acetate (contains ca. 20% Isobornyl Acetate)>70.0%(GC)Human, Mo

詳細介紹

產品名稱:線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法

規格:50管/48樣

測試方法:紫外分光光度法

分類:三羧酸循環系列

貨號:GOY-01S6586

客戶自備儀器和試劑

商品介紹:

測定意義

MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,線粒體中MDH是TCA循環的關鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統、活性氧代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細胞中,NAD-MDH分布于細胞質和線粒體中。

測定原理:

MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

特點:

1、優化設計的實驗方案,1小時即可完成

2、靈敏度高,操作便捷

3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑

儀器:

1、分光光度計/酶標儀(比色測定波長為550nm)

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

QQ截圖20220307153443.png 

 

樣品測定的準備:

1、細胞、細菌或組織樣品的制備 :

細菌或細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,棄上清;按照每100萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。

組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。

2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。

3、標準品的處理:稱取1mg,將標準品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。

小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒量杯 軟質草死 分析標準品多聚 CP,94.0%

小鼠黑色素抗體(MC Ab)試劑盒量杯氘代二氫萘 分析標準品多聚 96%

小鼠黑色素抗體(MC Ab)試劑盒痰杯苊烯 分析標準品,≥99%(GC)1,4-環己烷二(順+反異構體混合物) 99%

小鼠狀腺素(T4)試劑盒三色藥杯1,3-丁二烯 分析標準品N,N-二乙酰  ≥99.8%

小鼠狀腺素(T4)試劑盒試劑瓶苯菌靈 分析標準品N,N-二乙 99.0%

小鼠二肽肽Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒試劑瓶丁草 分析標準品,95%二乙 超純級,≥99.5%(GC)

小鼠二肽肽Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒試劑瓶炔草隆 分析標準品二乙 Standard for GC, ≥99.7% (GC)

小鼠過敏素/補體片斷4a(C4a)試劑盒試劑瓶苯并[g,h,i]芘 分析標準品二乙 CP,98%

小鼠過敏素/補體片斷4a(C4a)試劑盒試劑瓶Celite® 硅藻土545  助濾劑,碳鈉處理,通量煅燒二乙 AR,99%

小鼠三狀腺原氨(T3)試劑盒試劑瓶環沙星 分析標準品二乙 ACS, ≥99.0% (GC)

小鼠三狀腺原氨(T3)試劑盒方形試劑瓶環莠隆 分析標準品氧化二丁錫 98%(劇品)

小鼠補體片斷5a(C5a)試劑盒圓形果蠅瓶枯草隆 分析標準品氧化二丁錫 分析標準品(劇品)

小鼠補體片斷5a(C5a)試劑盒方形試劑瓶綠麥隆 分析標準品氧化二辛錫 98%

小鼠補體片斷3a(C3a)試劑盒不透明 閃爍瓶順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯 分析標準品乙 AR,99%

小鼠補體片斷3a(C3a)試劑盒透明 閃爍瓶鄰苯二二丁酯 分析標準品乙 CP,98%

小鼠17羥孕(17-OHP)試劑盒吸液槽1,2-標準溶液100mg/L,溶劑:乙 色譜固定液,30℃
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法猴肝配蛋白A受體3 (EPHA3)聯免疫吸附測定試劑盒S-1-芐氧羰-3-羧吡咯莖生擬莖點霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

γ1肌動蛋白(ACTG1)聯免疫吸附測定試劑盒S-1-芐氧羰-3-羧吡咯微小毛霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

I型前膠原羧端原肽(PICP)聯免疫吸附測定試劑盒(R)-(-)-1-Cbz-3-羥吡咯烷Rhizobium  multihospitium拉丁屬名: Pseudomonas eucalypticola

猴血管活性腸肽(VIP)聯免疫吸附測定試劑盒(R)-(-)-1-Cbz-3-羥吡咯烷Pseudomonas eucalypticola注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

C4結合蛋白α(C4BPα)聯免疫吸附測定試劑盒 三硅烷磺酯樹舌1-2拉丁屬名: Bacillus  pumilus

猴膽固酯轉移蛋白(CETP)聯免疫吸附測定試劑盒Daclatasvir (BMS-790052)短小芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus pumilus

猴嗜環蛋白/親環素B(CYPB)聯免疫吸附測定試劑盒  苯戊短小芽孢桿菌拉丁屬名: Annulohypoxylon multiforme

猴白介素12 p40(IL-12 p40)聯免疫吸附測定試劑盒苯戊多形環紋炭團菌拉丁屬名: Gordonia amicalis

猴載脂蛋白A2(ApoA2)聯免疫吸附測定試劑盒 苯戊友好戈登氏菌拉丁屬名: Lactobacillus helveticus

β干擾素(IFN-β)聯免疫吸附測定試劑盒4-氟-3-瑞士乳桿菌拉丁屬名: Candida maltosa

DNA結合蛋白(DBP)聯免疫吸附測定試劑盒 4-氟-3-麥芽糖假絲酵母拉丁屬名: Neurospora crassa

猴核糖核T2(RNASET2)聯免疫吸附測定試劑盒水蘇四糖,四水粗糙脈孢菌拉丁屬名: Xanthomonas campestris pv. holcicola

猴軟骨寡聚質蛋白(COMP)聯免疫吸附測定試劑盒  一氧化硅德夸菌素鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

猴絨毛蛋白(CVL/EZR)聯免疫吸附測定試劑盒 一氧化硅禾谷絲核菌拉丁屬名: Lecanicillium dimorphum

猴破骨相關受體(OSCAR)聯免疫吸附測定試劑盒化鑭,無水兩型蠟蚧菌拉丁屬名: Clavispora lusitaniae

猴半乳凝集素14(GAL14)聯免疫吸附測定試劑盒化鑭,無水葡萄牙棒孢酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。


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