詳細介紹
商品介紹:
PF-04447943是一種有效的人重組PDE9A抑制劑,IC50為12nM,比作用于其他PDE家族成員選擇性高78倍(IC50>1000nM)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1082744-20-4 純度:99.77% 分子式:C??H??N?O? 分子量:395.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PF-04447943 | 1mL(10mM)|5mg|10mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
綠色糖單孢菌外基質磷化抗體Human HPSE(Heparanase) ELISA Kit尿游離皮質(UFC)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌肥大蛋白7抗體Human MRAS ELISA Kit尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA Kit
白僵菌微管相關蛋白4抗體Human MRE11 ELISA Kit尿微量白蛋白(MAU)ELISA Kit
普通變形桿菌26S蛋白調節亞型7抗體Human MRI1 ELISA Kit尿微量白蛋白(ALB)ELISA Kit
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種蛋白酪磷非受體型4抗體Human MRFAP1 ELISA Kit尿相關蛋白C(UreC)ELISA Kit
墳墓節桿菌腦腸肽O?;D移抗體Human MRM1 ELISA Kit尿嘧啶核苷磷化1(UPP1)ELISA Kit
水生黃桿菌轉錄調控因子MRG15抗體Human G6PD(Glucose-6-phosphate 1-dehydrogenase) ELISA Kit尿激型纖溶原激活因子(uPA)ELISA Kit
費氏中華根瘤菌髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體Human OPRM1(Mu-type opioid receptor) ELISA Kit尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA Kit
長雙歧桿菌T淋巴成熟相關蛋白抗體Human MPP3 ELISA Kit尿激型纖溶原激活物(uPA/PLAU)ELISA Kit
串珠鐮孢甲基二尿癥cblA抗體Human TLR9(Toll-like receptor 9) ELISA Kit尿激型纖溶原激活物(uPA)ELISA Kit
黃海鞘盒菌非平滑肌肌球蛋白2A抗體Human MPPE1 ELISA Kit尿激型纖溶原激活劑受體(uPAR)ELISA Kit
枯草芽胞桿菌枯草亞種DNA修復甲基磺敏感性基因19抗體Human MOGAT2 ELISA Kit尿激(UK)ELISA Kit
針葉樹散斑殼19號染色體開放閱讀框28抗體Human MOGAT1 ELISA Kit尿肌酐(UCR)ELISA Kit
醬油曲霉珠蛋白1抗體Human MOK ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖神經酰葡萄糖基轉移(UGCG)ELISA Kit
露濕漆斑菌肌紅蛋白抗體Human MPPED1 ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖轉移2(UGT2)ELISA Kit
節桿菌錯配修復蛋白6抗體Human MPPED2 ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖轉移1(UGT1)ELISA Kit
黑根霉Rhizopus│niger 質量規格:>98%,BR白果內酯
長枝木霉Trichoderma│longibrachiatum Rifai 質量規格:>98%,BR銀杏內酯C
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格:>99%,BR銀杏內酯B
人重組PDE9A抑制劑(PF-04447943)EGF 表皮生長因子抗體(大鼠)酯 ≥99%(GC)
EGFL7 類表皮生長因子域7抗體酯 for HPLC, ≥99.5% (GC)
EGFR 表皮生長因子受體抗體酯 無水級, 99.5%
EF1 Alpha 延伸因子EF-1a抗體肉桂酯 99%
EGFRvIII 表皮生長因子受體III型突變體抗體肉桂酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG
Egr-1 早期生長應答蛋白1抗體酯 99%
eIF2 alpha 真核啟動因子2α抗體酯 ≥99%, FCC
Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 化真核啟動因子2α抗體癸酯 Standard for GC ,≥99.5% (GC)