詳細介紹
商品介紹:
細胞膜染色試劑盒是用一種親脂性的橙色熒光探針進行細胞膜染色。染色液I 進入細胞膜后,在整個細胞膜上擴散,佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液I在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,被激發后可以發出橙色的熒光,具有很高的淬滅常數和激發態壽命。 染色液I 通常不會明顯影響細胞的活力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。 儲存條件:4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。 有效期:六個月。 |
產品屬性:
中文名稱:細胞膜染色試劑盒(橙色熒光)-M03
英文名稱:
產品規格:1000T|5000T
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
連翹酯苷E(標準品)英文名稱: 2-Hydroxy-5-nitronicotinic acidB淋巴生發中心相關蛋白抗體包裝25g
蓮心堿(標準品)英文名稱: Hexatriacontane鱗狀癌增強蛋白1抗體包裝5g
蓮心堿高鹽英文名稱: HexatriacontaneGα gust抗體包裝1g
蓮心堿高鹽(標準品)英文名稱: Hexadecane谷酰抗體包裝10g
蓮須(標準品)英文名稱: Hexadecane絨毛膜特異性轉錄因子GCMa抗體包裝50g
蓮子(標準品)英文名稱: 1-HexanolG蛋白結合蛋白5抗體包裝1g
蓮子心(標準品)英文名稱: 1-Hexanol腫瘤/抗原家族4亞型7抗體包裝25g
兩面針(標準品)英文名稱: 1-HexadecanolGDNF家族受體α3抗體 GFR α3包裝5g
亮菌(標準品)英文名稱: 1,6-Hexanediol甘受體β/GlyR β抗體包裝100g
遼東楤木皂苷X(標準品)英文名稱: Heptadecane神經甘肽樣肽GALP抗體包裝25g
了哥王(標準品)英文名稱: Hentriacontane甘肽受體2抗體包裝5g
烈香杜鵑(標準品)英文名稱: Hexacosane甘肽受體3抗體包裝1g
烈香杜鵑油(標準品)英文名稱: 2,5-Hexanedione腦腸肽受體抗體包裝25g
林生續斷苷I英文名稱: 2,5-HexanedioneGRC5蛋白抗體包裝5g
林澤蘭內酯B(標準品)英文名稱: 3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester腸和大腦特定同源蛋白1抗體包裝1g
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質量規格:>98.0%,可用于培養羥脯試劑盒沒食子兒茶;(-)-Gallocate
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,標準品強啡肽試劑盒木糖;D-Xylose
蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質量規格:>98.0%潛伏轉化生長因子β結合蛋白2試劑盒3-O-沒食子酰粘;3-O-gallo
細胞膜染色試劑盒(橙色熒光)-M03香菇 二硅化鉻磷酸化過氧化物體增殖物激活受體γ抗體Elisa
假單胞 化鉿防御α2Elisa
膠孢 碲化銀(I)防御α3Elisa
金色毛殼 (S)-(-)-3-氨基奎寧 活化蛋白C抵抗Elisa
Pseudomonas plecoglossicida 2,3,9,10,16,17,23,24-八辛氧基-29H,-31H-酞菁染料多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉移7Elisa
Xenorhabdus 對傘花烴鎘金屬硫蛋白Elisa
阿氏芽孢桿 優葛縷酮成纖維生長因子6Elisa
大腸桿 雷沙吉蘭無翅型MMTV整合位點家族成員9AElisa
釀酒酵母 氯化(茚基)雙(三苯基膦)釕(II)肌蛋白Fbox-1Elisa
非無藥品 沙門(陽性) Ampiroxicam肌肉特異性泛蛋白連接1Elisa
費氏中華根瘤 甲基叔戊基活化轉錄因子6Elisa
枝狀枝孢 甲氧基聚乙二馬來酰前列腺分泌蛋白Elisa
稻平臍蠕孢 β-Calcitonin Gene Related Peptide human流感病A IgM抗體Elisa
青銅色小單孢 4-溴-3-甲囊蟲病Elisa
賴氨酸芽胞桿屬 5(6)-TAMRA [5-(6)-Carboxytetramethylrhodamine]副流感病1,2,3型IgG抗體Elisa