產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PRMT5抑制劑(GSK3326595)
英文名稱:GSK3326595
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
GSK3326595是PRMT5的抑制劑,來自WO2016022605A1,F(xiàn)ormula A。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1616392-22-3 純度:99.24% 分子量:452.55 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
楊盤二孢菌*RhoA抗體Anti-DYRK1A Antibody原鈣黏8(PCDH8)
葡萄汁有孢漢遜酵母Rho相關(guān)蛋白激2抗體Anti-DVL3 Antibody原鈣黏7(PCDH7)
河生萊略特氏菌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體Anti-E2F1 Antibody原鈣黏24(PCDH24)
彎曲假單胞菌活性氧簇ROS抗體Anti-E2F2 Antibody原鈣黏22(PCDH22)
擬可可毛球二孢磷化遷移誘導(dǎo)因子5抗體Anti-E2F3 Antibody原鈣黏21(PCDH21)
皮狀假絲酵母磷化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Anti-E2F2 Antibody原鈣黏20(PCDH20)
空腸彎曲桿菌磷化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體Anti-E2F3 Antibody原鈣黏19(PCDH19)
冷解糖芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體Anti-E2F4 Antibody(PB1113)原鈣黏18(PCDH18)
異常漢遜酵母復(fù)制因子A蛋白2Anti-E2F4 Antibody原鈣黏17(PCDH17)
鏈霉菌磷化復(fù)制因子A蛋白2抗體Anti-EAAT3/SLC1A1 Antibody原鈣黏15(PCDH15)
雞傳染性法氏囊病陽性血清 Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體Anti-E2F6 Antibody原鈣黏12(PCDH12)
蕈狀芽孢桿菌磷化ras基因相關(guān)蛋白R(shí)ab24抗體Anti-E2F5 Antibody原鈣黏11(PCDH11)
塔賓曲霉磷化ras基因相關(guān)蛋白R(shí)ab24抗體Anti-EAPP Antibody原鈣黏10(PCDH10)
土生類諾卡氏菌磷化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-ECI1 Antibody原卟啉原氧化(PPOX)
釀酒酵母磷化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-EBAG9 Antibody原卟啉(EPP)
焦曲霉磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Anti-ECE1 Antibody魚精蛋白3(PRM3)
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%
: 長(zhǎng)傳2514資源名稱: 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格:0.98
PRMT5抑制劑(GSK3326595)蔥綠鏈霉 1%NaCl乳糖血吸蟲抗體Elisa
靈芝 異煙酸乙酯磷脂Elisa
薄花邊傘 1%NaCl纖維二糖水泡病抗體Elisa
甘蔗生節(jié)棱孢 明膠鉤端螺旋體抗體Elisa
釀酒酵母 3-氨基-1-多殺性巴氏桿抗體Elisa
韓國溶桿 1%NaCl阿拉伯糖支氣管敗血波氏桿抗體Elisa
美澳型核果褐腐病 精氨酸雙水解肉湯D-木糖Elisa
五指山布勒擔(dān)子酵母 1%NaCl甘露糖偽狂犬病病抗體Elisa
耐鹽魏斯氏 2,6-二氨基-4-嘧啶生存Elisa
黑曲霉 3%NaCl精氨酸脫羧戊肝抗原Elisa
淡紫擬青霉 3%NaCl氨基酸脫羧對(duì)照血紅蛋白Elisa
金色馬賽 2-異基-4-甲基噻唑藍(lán)耳病Elisa
釀酒酵母 3%NaCl蔗糖痢疾密螺旋體抗體Elisa
串珠鐮孢* 3%NaCl甘露肝鈉Elisa
木蹄層孔 3%NaCl乳糖誘導(dǎo)型NO合Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)