PDK1抑制劑(GSK2334470)公司正在出售的產(chǎn)品：mouse Caspase-8 小鼠Caspase-86 激光級(jí)
mouse Caspase-9 小鼠Caspase-94--5--1,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮 98%
兔因子試劑盒 兔因子試劑盒皮質(zhì)甾酮 98%
KGF 2 Rabbit 兔角質(zhì)生長因子 2對(duì)酰苯 98%
Rabbit MMP-9

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

金黃色葡萄球菌瘦受體抗體Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白20(CK-20)

枯草芽孢桿菌項(xiàng)韌帶彈性蛋白抗體Human PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白20(CK20)

粘鞭霉氧化低密度脂蛋白抗體Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit角蛋白19(CK-19)

香菇轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4抗體Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白18-M65(CK 18-M65)

香菇G蛋白偶聯(lián)受體69BHuman PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白18-M30(CK 18-M30)

草青霉李斯特菌菌體蛋白抗體Human PIK3C2G ELISA Kit角蛋白18(CK-18)

假單胞菌屬Rho的鳥嘌呤核苷交換因子12抗體Human PILRA ELISA Kit角蛋白17(CK17)

果生鏈核盤菌白血病相關(guān)蛋白5抗體Human PIGB ELISA Kit角蛋白13(CK-13)

三棱孢小囊菌富含亮重復(fù)蛋白62抗體Human PIM2(Serine/threonine-protein kinase pim-2) ELISA Kit間粘附分子3(ICAM-3/CD50)

米氏假單胞菌淋巴磷蛋白磷相關(guān)蛋白抗體Human PI3K p55(gamma) ELISA Kit間粘附分子2(ICAM-2/CD102)

解淀粉周培瑾氏菌含亮神經(jīng)膠質(zhì)瘤失活蛋白4抗體Human KLB(Beta-klotho) ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1/CD54)

皺曲毛殼淋巴性白血病相關(guān)序列1抗體Human PIF1 ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1)

鼠乳桿菌L-瓜抗體Human PICK1 ELISA Kit性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)

釀酒酵母半胱蛋白抗體Human PIGK ELISA Kit相關(guān)蛋白A(CagA)

釀酒酵母乳脫氫D抗體Human PIG3 ELISA Kit(CTX)

福氏志賀氏菌蛋白激LYK5抗體Human PIGA ELISA Kit凋亡抑制因子(IAP)

傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(N)松脂二葡萄糖苷

彎孢單頂孢Monacrosporium│gampsosporum 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)吳茱萸次堿

小單孢菌Micropolyspora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)吳茱萸堿
PDK1抑制劑(GSK2334470)畢赤酵母 對(duì)苯色氧化Elisa

硬柄小皮傘 4-甲氧基苯乙烯甲硫氨酸腦啡肽Elisa

*蜜環(huán) 對(duì)甲苯肼鹽酸鹽5羥色Elisa

孟氏假單胞 1-溴-3-苯基烷曼氏桿抗體Elisa

蠟樣芽孢桿 賓雪德拉氏綠隱色堿巴氏桿A型抗體Elisa

禾谷鐮孢 二苯基環(huán)己基膦葡萄糖Elisa

金耳 Z-L-苯氨病性腹瀉病抗體Elisa

變異短波單胞 3-肼鹽酸鹽巴貝斯蟲病抗體Elisa

橄欖色盤多毛孢 環(huán)己烯甲酸雙芽巴貝斯蟲病抗體Elisa

糞鏈球 間苯二甲酸-5-磺酸鈉（5-SSIPA）Ⅲ型膠原蛋白Elisa

羊肚 5-Ⅱ型膠原蛋白Elisa

黑曲霉 2--4'-苯基苯乙酮蛋白Elisa

中國臺(tái)灣根霉 苯基丁二酸饑餓Elisa

長雙歧桿長亞種 1,2,3,4-四氫喹啉環(huán)加氧1Elisa

細(xì)孢毛霉 鄰甲苯基肼鹽酸鹽環(huán)加氧2Elisa