詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Pifithrin-β hydrobromide | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Pifithrin-β是有效的p53抑制劑,IC50值為23μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:511296-88-1 別名:Cyclic Pifithrin-α hydrobromide;Cyclic PFT-α hydrobromide;PFT-β hydrobromide 純度:99.90% 分子量:349.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
鏈孢囊菌磷化信號轉導分子SMAD3抗體Anti-PDPN Antibody粒鈣蛋白(GCA)
三葉草根瘤菌磷化信號轉導分子SMAD2抗體Anti-PDPN Antibody利鈉肽受體3(NPR3)
膜醭畢赤酵母磷化核突觸蛋白α抗體Anti-PDPN Antibody利鈉肽受體2(NPR2)
釀酒酵母磷化核突觸蛋白α抗體Anti-PDPN Antibody利鈉肽受體1(NPR1)
類食品乳桿菌磷化神經突觸1抗體Anti-PDPN Antibody犁鼻1受體5(VN1R5)
蕈狀芽孢桿菌磷化神經突觸1抗體Anti-PDX1 Antibody犁鼻1受體4(VN1R4)
蘇云金芽孢桿菌磷化神經突觸1抗體Anti-PEBP1 Antibody犁鼻1受體3(VN1R3)
圓弧青霉磷化神經突觸前膜胞內蛋白抗體Anti-PEBP1 Antibody犁鼻1受體2(VN1R2)
硫磺菌組蛋白甲基轉移SMYD3抗體Anti-PECAM1 Antibody犁鼻1受體1(VN1R1)
廈門海源桿菌滑膜肉瘤X斷點蛋白8抗體Anti-PECAM1 Antibody脂肪A(LPHA)
維多利亞維希尼克氏酵母磷化信號轉導和轉錄激活因子6抗體Anti-PECAM1 Antibodyδ1(TPSδ1)
膠孢磷化原癌基因蛋白18Anti-PECAM1 Antibodyγ1(TPSγ1)
Ensifer adhaerens絲/蘇蛋白激38抗體Anti-PECAM1 Antibodyβ2(TPSβ2)
暗孢節菱孢菌分選連接蛋白1抗體Anti-PECAM1 Antibody(TPS)
伯氏致病桿菌GTP激活因子STARD8抗體Anti-PECAM1 Antibody(PB0113)固生成因子1(SF1)
大腸埃希菌絲蛋白抑制劑A11抗體Anti-PEF1 Antibody固硫酯同工S(STS)
NADH脫氫α家族8抗體紅假單胞菌屬人子宮癌組織源細胞提取物
NADH脫氫黃蛋白1抗體蕈狀芽孢桿菌人皮膚癌組織源細胞提取物
線粒體復合物NDUFS3蛋白抗體變灰青霉人體宮頸癌組織源細胞提取物
利鈉肽受體B抗體瑞氏青霉人膠質瘤組織源細胞提取物
p53抑制劑(Pifithrin-β)煙曲霉 Tanshinlactone過氧化物體增殖物激活受體α2Elisa
球孢白僵 Noreugenin甘油二酯O-酰基轉移Elisa
根瘤 Pinostilbenoside周期ⅠElisa
異常威克漢姆酵母 ConfluentinAurora激AElisa
根霉屬 Norcepharadione B分裂周期因子20Elisa
果生鏈核盤 Carpachromene周期B1Elisa
釀酒酵母 Penduletin分裂周期因子2Elisa
雞腿菇 SteppogeninMyc原癌基因蛋白Elisa
相思根瘤 Hinokiol內啡肽Elisa
糙皮側耳 Canadine諾達病Elisa
糞腸球 Friedelanol纖維Elisa
費氏中華根瘤(未復核) Oleuropeic acid補體1qElisa
大禿馬勃 Lecanoric acid精蛋白1Elisa
釀酒酵母 Dihydrophaseic acid核因子κBElisa
假單孢 Lacinilene C三磷酸腺檸檬酸裂解Elisa