詳細介紹
商品介紹:
LDC000067是高度選擇性的CDK9抑制劑,體外實驗的IC50值為44±10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1073485-20-7 別名:LDC067 純度:98.14% 分子量:370.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
LDC000067 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
乳鏈球菌腫瘤壞死因子誘導蛋白3相互作用蛋白1抗體Anti-HSPA9 Antibody脫氧鳥苷激(DGUOK)
熱帶假絲酵母四連接TN抗體Anti-HSPB1 Antibody脫氧核糖核Ⅹ(DNASEⅩ)
厚垣鐮孢菌Toll樣受體1抗體Anti-HSPA9 Antibody脫氧核糖核Ⅱ(DNASEⅡ)
鼠李糖乳桿菌DNA拓普西異構ⅡA抗體Anti-HSPB2 Antibody脫氧核糖核Ⅰ樣2(DNASE1L2)
枯草芽孢桿菌三葉肽因子2抗體Anti-HSPB1 Antibody(PB0218)脫氧核糖核Ⅰ(DNASE1)
米曲霉端粒結合蛋白2抗體Anti-HSPB8 Antibody脫氧輔蛋白羥化/單加氧(DOHH)
多主葡萄殼菌形成相關凋亡蛋白7抗體Anti-HSPB2 Antibody脫氧輔蛋白合(DHPS)
鞘單胞菌端粒相關蛋白1抗體Anti-HSPB8 Antibody脫氧吡啶酚(DPD)
康寧木霉谷酰轉3抗體Anti-HSPB6 Antibody脫氧胞苷激(DCK)
構巢曲霉環指蛋白92抗體Anti-HSPD1 Antibody脫鐵轉鐵蛋白(apoTf)
米根霉環指蛋白調節蛋白激C蛋白抗體Anti-HSPE1 Antibody褪黑受體1B(MTNR1B)
沉積物鹽坑微菌TRIM50蛋白抗體Anti-HSPBAP1 Antibody褪黑受體1A(MTNR1A)
紫麥角菌環指蛋白88抗體Anti-HSPG2 Antibody突觸足蛋白(SYNPO)
大豆慢生根瘤菌鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體Anti-HSPD1 Antibody(PB0301)突觸(SYP)
食物芽孢桿菌環指蛋白98抗體Anti-HSPH1 Antibody突觸伸蛋白2(SYNJ2)
大腸埃希菌環指蛋白16抗體Anti-HSPG2 Antibody(PB0302)突觸伸蛋白1(SYNJ1)
RhoGTP激活蛋白13抗體檸檬桿菌屬人牙周膜成纖維細胞
信號轉導與轉錄激活因子1抗體靈芝人前脂肪細胞
轉錄因子蛋白SIM1抗體糙皮側耳小鼠成骨細胞
核轉錄因子SOX14抗體膠韌革菌(榆耳,榆蘑)小鼠骨骼肌衛星細胞
CDK9抑制劑(LDC000067)巴斯德畢赤酵母 黃腐植酸直接低密度脂蛋白膽固Elisa
異配囊接霉卵孢變種 鉻、銅、鈉/Cr, Cu, Na大腸桿病Elisa
松口蘑 鎘、汞、鉛/Cd, Hg, Pb頂體Elisa
銅綠假單胞 頭孢拉定多配體蛋白聚糖1Elisa
蠟狀芽孢桿 鋇、鈣、鍶/Ba, Ca, Sr硫酸乙酰肝Elisa
香菇 、磷、鋯/B, P, Zr心肌型肌酸激同工MBElisa
側雄腐霉 鹽酸納洛酮乙型腦炎病IgG抗體Elisa
黃微綠鏈霉 金、鉑、銠/Au, Pt, Rh游離膽固Elisa
伊平屋橋大洋芽孢桿 鋁、鐵、鋅/Al, Fe, Zn支鏈氨基酸Elisa
耐久腸球 鹽酸納洛酮成纖維生長因子21Elisa
金針菇 鋰、鈉、、銨/Li, Na, K, NH4饑餓Elisa
土地桿 N-乙酰-D-半乳糖α淀粉Elisa
無環田頭菇 鋰、鈉、、銨/Li, Na, K, NH4過氧化物Elisa
殺結核鏈霉 鑭、鈰、釤、釔/La, Ce, Sm, Y髓過氧化物Elisa
松口蘑 3--L-酪氨酸總膽紅Elisa