詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:NAMPT抑制劑
英文名稱:GNE-617 hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
GNE-617hydrochloride是一種特異性的NAMPT抑制劑,抑制NAMPT活性,IC50為5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 純度:98.83% 分子量:463.88 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
維羅納假單胞菌5-羥色受體5A抗體Anti-PDE6 alpha/PDE6A Antibody連接橋粒斑珠蛋白(JUP)
枯草芽孢桿菌5-羥色受體7抗體Anti-PDE6 beta/PDE6B Antibody連接附著分子3(JAM3)
韓國游動微菌SCEL蛋白抗體Anti-PDGFB Antibody連接附著分子1(JAM1)
茶藨子葡萄座腔菌相關抗原8抗體Anti-PDGFB Antibody連接蛋白4(JPH4)
美味絲葚霉T淋巴識別的鱗狀癌抗原抗體Anti-PDGFB Antibody連接蛋白3(JPH3)
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種S100A2抗體Anti-PDGFRA Antibody連接蛋白2(JPH2)
糞銹傘周期G2/M期快速誘導蛋白SPDYA抗體Anti-PDGFRB Antibody連接蛋白1(JPH1)
不動桿菌屬5-羥色受體6抗體Anti-PDK1 Antibody連環蛋白δ2(CTNNδ2)
Aurantimonas altamirensis ATP依賴解旋SMARCA2抗體Anti-PDIA3 Antibody(PB0808)連環蛋白δ1(CTNNδ1)
紅色長孢鏈霉菌S期激相關蛋白1抗體Anti-PDIA3 Antibody連環蛋白β1(CTNNβ1)
大雞03SHFM3蛋白抗體Anti-PDK1 Antibody連環蛋白α3(CTNNα3)
粗糙脈孢菌硫氧還蛋白1抗體Anti-PDK2 Antibody連環蛋白α2(CTNNα2)
科氏葡萄球菌科氏亞種信號轉導銜接蛋白1抗體Anti-PDK4 Antibody連環蛋白α1(CTNNα1)
蠟狀芽孢桿菌磷化酪蛋白激Fyn/同步原癌基因抗體Anti-PDK2 Antibody粒特異性抗核抗體(GSANA)
韓芝絲棕櫚酰轉移2抗體Anti-PDK4 Antibody粒趨化蛋白2(GCP2)
產氣莢膜梭菌 C型磷化信號轉導分子SMAD3抗體Anti-PDPK1 Antibody粒集落激因子受體(GCSFR)
中心粒蛋白Nudel抗體Mucilaginibactermallensis人胰腺上皮細胞提取物
泛樣蛋白NEDD8抗體克氏葡萄球菌人乳腺上皮細胞提取物
NADH氧化還原輔10抗體Bacteroidesovatus人淋巴管內皮細胞提取物
線粒體復合物NDUFS4蛋白抗體Streptomycesrapamycinicus人直腸癌組織源細胞提取物
NAMPT抑制劑粟粒皮禿馬勃 Eucamalol氧化低密度脂蛋白Elisa
根瘤 Jaceidin triacetate雙氫睪酮Elisa
微管螺旋鏈霉 Kaempferol 3,4,7-triacetate堿性成纖維生長因子Elisa
釀酒酵母 Ponasterone A甜菜堿高半胱氨酸甲基轉移Elisa
植物乳桿 Heudelotinone組織蛋白BElisa
華盛頓腥擲孢 Pimaric acid組織蛋白LElisa
孟氏假單胞 Ssioriside組織蛋白HElisa
暗黃紫色小單孢 Cerberidol基質金屬蛋白7Elisa
淺黃曲霉 Sculponeatin O甜菜堿Elisa
大腸埃希氏 Sootepin D3,3,5-狀腺氨酸Elisa
小孢根霉華變種 ThevebiosideI型甲腺原氨酸脫Elisa
假單孢 Tachioside肌Elisa
咸海鮮芽孢桿 Erigeside C硬脂酰去飽和1Elisa
根瘤 Myricananin A肉堿棕櫚酰基轉移1αElisa
泡盛曲霉 Quinovin脂肪酸合成Elisa