eIF4E與eIF4G相互作用抑制劑(4EGI-1)公司正在出售的產(chǎn)品：vaspin(Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白抑制劑雷尼鎳催化劑 50μm
PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit 人蛋白雷尼鎳催化劑 150μm
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商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：eIF4E與eIF4G相互作用抑制劑(4EGI-1)

英文名稱：4EGI-1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

盤(pán)孢菌Rho鳥(niǎo)甘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-BRD7 Antibodyα2纖溶抑制物(α2-PI)

球孢白僵菌磷化磷脂酰肌激抗體Anti-BRD2 Antibodyα2抗纖溶(α2-AP)

蘇云金芽孢桿菌磷化帕金蛋白抗體Anti-BRMS1 Antibodyα2巨球蛋白(α2-MG)

大腸埃希氏菌磷化帕金蛋白抗體Anti-BRS3 Antibodyα1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)

擬諾卡氏菌屬磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體B抗體Anti-BRMS1 Antibodyα1微球蛋白(α1-MG)

Cyberlindnera磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體B抗體Anti-BSG Antibodyα1微球蛋白(MGα1)

水生異常球菌P21蛋白激活的蛋白激6抗體Anti-BSG Antibodyα1性糖蛋白(α1-AGP)

稻黃桿菌磷化P21蛋白激活的蛋白激6Anti-BSG Antibodyα1抗胰糜蛋白(AACT)

產(chǎn)黃青霉酪磷α抗體Anti-BTC Antibodyα1抗(α1-AT)

草木樨中華根瘤菌非受體型蛋白酪磷7抗體Anti-BSG Antibody(PB0239)α1防御(DEFA1)

細(xì)黃鏈霉菌磷化非受體型蛋白酪磷7抗體Anti-BTC Antibodyα1β糖蛋白(α1β-GP)

湖北擬酵母磷化非受體型蛋白酪磷7抗體Anti-BTG2 Antibodyα/β干擾受體(IFN-α/βR)

NRRL B-2354 屎腸球菌（現(xiàn)2）磷化蛋白激C亞性D型抗體Anti-BUB1 AntibodyZ-DNA結(jié)合蛋白1(ZBP1)

蘋(píng)果輪紋病蛋白激C mu型抗體Anti-BTK AntibodyXC趨化因子受體1(XCR1)

灰色鏈霉菌灰色亞種纖溶原激活物抑制因子抗體Anti-BTLA AntibodyWnt-3a蛋白(WNT3A)

澤普林假絲酵母胃蛋白原C抗體Anti-BUB1B Antibodyv-rel禽網(wǎng)狀內(nèi)皮過(guò)多癥病癌基因同源物B(RelB)

: N.326f資源名稱: 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格：0.98

海源菌Idiomarina│sp. 質(zhì)量規(guī)格：98%，進(jìn)口分包

: F472資源名稱: 溜曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>98%
eIF4E與eIF4G相互作用抑制劑(4EGI-1)花生生莖點(diǎn)霉 鄰苯乙酮單核趨化蛋白1Elisa

大腸埃希 3-苯乙酮端粒Elisa

南冰川酵母 (1S)-(+)-樟腦－10－磺酰多巴Elisa

鏈格孢 -4-羧酸干擾誘導(dǎo)蛋白10Elisa

嗜鹽沉積物桿 4'-二甲基氨基苯乙酮過(guò)敏性遲緩反應(yīng)物質(zhì)Elisa

大腸埃希 (1R,2R)-N,N'-雙[3-氧代-2-(2,4,6-三酰)亞丁基]-1,2-二苯基乙二過(guò)氧化脂質(zhì);乳過(guò)氧化物Elisa

更新世肉桿 (S)-(+)-扁桃酸甲酯褐黑Elisa

解淀粉芽孢桿 1,2-十四碳二環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷Elisa

假單孢 3-噻吩二酸環(huán)磷酸腺苷Elisa

米曲霉 2,3,4-氧基苯甲緩激肽Elisa

葡萄酒有孢漢遜酵母 2--3-肌鈣蛋白TElisa

曲霉 1-金剛烷甲酰基質(zhì)金屬蛋白9Elisa

猴頭 苊烯基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1Elisa

均態(tài)諾卡氏 8-羥基喹啉鋁降鈣基因相關(guān)肽Elisa

大腸埃希氏 1-甲基基-2-甲結(jié)合珠蛋白Elisa