詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Kenpaullone | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
Kenpaullone是一種有效的CDK1/cyclin B和GSK-3β抑制劑,IC50值分別為0.4μM和23nM,同時可抑制CDK2/cyclin A,CDK2/cyclin E和CDK5/p25的活性,IC50值分別為0.68μM,7.5μM和0.85μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:142273-20-9 別名:9-Bromopaullone;NSC-664704 純度:98.09% 分子量:327.18 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
黑曲霉PE標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-YTHDF2 Antibody垂體腺苷環(huán)化激活肽受體(PACAPR)
貝倫格勒座腔菌梨專化型APC標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-XRCC6 Antibody(PB0524)垂體腺苷環(huán)化激活肽(ADCYAP1)
海南吉爾霉Alexa Fluor 350標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-YBX1 Antibody穿孔1(PRF1)
pLCDH-ciRAlexa Fluor 488標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-XRCC6 Antibody觸珠蛋白相關蛋白(HPR)
甜芝(靈芝屬之一種)Alexa Fluor 555標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-YAP1 Antibody成釉蛋白(AMBN)
谷棒桿菌Ⅲ型Alexa Fluor 647標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-YES1 Antibody成纖維生長因子受體樣蛋白1(FGFRL1)
單胞菌辣根過氧化物標記的兔抗長爪沙鼠IgGAnti-YWHAE Antibody成纖維生長因子受體4(FGFR4)
貝氏不動桿菌辣根過氧化物標記的兔抗水貂IgGAnti-ZAP70 Antibody成纖維生長因子受體3(FGFR3)
劉志恒氏菌生物標記的兔抗水貂IgGAnti-ZBTB16 Antibody成纖維生長因子受體2(FGFR2)
青霉狀粘帚霉Cy3標記的兔抗水貂IgGAnti-YWHAZ Antibody成纖維生長因子受體1(FGFR1)
海芋平臍蠕孢Cy5標記的兔抗水貂IgGAnti-ZBTB7A Antibody成纖維生長因子7(FGF7)
豬丹絲菌Cy5.5標記的兔抗水貂IgGAnti-ZBTB7A Antibody成纖維生長因子5(FGF5)
PaenibacillusCy7標記的兔抗水貂IgGAnti-ZEB2 Antibody成纖維生長因子3(FGF3)
Acinetobacter pittii Nemec et al. PE標記的兔抗水貂IgGAnti-ZFP42 Antibody成纖維生長因子21(FGF21)
玫瑰單胞菌屬PE-Cy3標記的兔抗水貂IgGAnti-ZEB1 Antibody成纖維生長因子19(FGF19)
旋枝霉PE-CY5標記的兔抗水貂IgGAnti-ZEB2 Antibody成纖維生長因子18(FGF18)
內皮細胞纖溶原激活抑制蛋白1抗體脫氮假單胞菌大鼠腸微血管組織提取物
前列腺癌和乳腺癌高表達蛋白抗體脫氮付球菌大鼠大隱靜脈組織提取物
前動力蛋白2抗體桃色歐文氏菌大鼠主動脈組織提取物
原鈣粘蛋白γB5抗體丁香假單胞菌大鼠血管組織提取物
CDK1/cyclin B和GSK-3β抑制劑壞損假尾孢 Rubianthraquinone
淺白隱球酵母 Pterisolic acid F
卵形巴貝斯蟲(靈寶株) Pterisolic acid C
土曲霉 Perilloxin
發(fā)光假蜜環(huán) Pepluanin A
類銀白紫絲膜 Paeonilactone C
芽孢桿 Onitin 2'-O-glucoside
銅綠假單胞 N-Methylnuciferine
Pt彩色豆馬勃6-4 Neorauflavene
韋斯特迪克氏曲霉 Neolinine
熱帶假絲酵母 N1-Methoxymethyl picrinine
副溶血弧 Melilotigenin C
大腸埃希氏 Melilotigenin B
果生鏈核盤 涼山香茶菜A
香菇 Laxiracemosin H