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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
DAPI solution,1mg/ml | 1ml | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
本產品為DAPI水溶液，濃度為1mg/ml。使用時根據實驗不同直接將本產品用相應溶液稀釋到工作濃度。 CAS號：28718-90-3 分子式：C16H15N5·2HCl 分子量：350.25 儲存條件：?20℃避光保存，有效期至少2年 純度：≥90% (HPLC和 TLC) DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚)是一種能夠與DNA中大部分A，T堿基相互結合的熒光染料﹐常用于熒光顯微鏡觀測。因為DAPI可以透過完整的細胞膜﹐它可以用于活細胞和固定細胞的染色。當DAPI與雙鏈DNA結合時，大吸收波長為358nm，大發射波長為461nm。DAPI的發射光為藍色，且DAPI和綠色熒光蛋白GFP或Texas Red染劑(紅色熒光染劑)的發射波長僅有少部分重疊，可以利用這項特性在單一的樣品上進行多重熒光染色。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
α-胞襯蛋白(SPTAN1)英文名稱：SPTAN1 ELISA Kit鈣連蛋白抗體包裝500g
α白蛋白(AFM)英文名稱：AFM ELISA Kit二氫嘧啶相關蛋白2抗體包裝50mg
α2-纖溶抑制因子(α2PI)英文名稱：α2PI ELISA Kit色P450ⅡE1抗體包裝1g
α2-巨球蛋白(α2M)英文名稱：α2M ELISA Kit趨化因子受體1抗體包裝100g
α2-HS糖蛋白(αHSG)英文名稱：αHSG ELISA Kit磷化原癌基因c-Raf抗體包裝25g
α1-微球蛋白(α1M)英文名稱：α1M ELISA Kit磷化致癌基因C-Myc抗體包裝500g
α1-性糖蛋白(α1AGP)英文名稱：α1AGP ELISA KitCD33抗體包裝1g
α1-抗(α1AT)英文名稱：α1AT ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g
Zeste同源物增強子1(EZH1)英文名稱：EZH1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝1g
YY肽(PYY)英文名稱：PYY ELISA Kit離子通道蛋白3抗體包裝25g
X-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)英文名稱：XRCC6 ELISA Kit磷化周期E抗體包裝5g
X-射線修復交叉互補蛋白5(XRCC5)英文名稱：XRCC5 ELISA Kit磷化分裂周期蛋白25C抗體包裝250mg
X-框結合蛋白1(XBP1)英文名稱：XBP1 ELISA Kit磷化周期依賴性激9抗體包裝1g
Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)英文名稱：WFS1 ELISA Kit磷化Connexin 43蛋白抗體包裝5g
WNT1誘導信號通道蛋白1(WISP1)英文名稱：WISP1 ELISA Kit絲切蛋白抗體包裝100g
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格：純度98%以上異質性胞核核糖核蛋白G試劑盒乙酰纈草三酯;Acevaltratum
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格：>99%,BR異質性胞核核糖核蛋白E試劑盒乙酰哈巴苷;8-O-Acetylharp
CGMCC1.5361=JCM14000資源名稱: 黃微球菌 質量規格：含量測定異質性胞核核糖核蛋白D試劑盒異型南五味子丁;Heterocliti
DAPI溶液(1mg/ml)食淀粉乳桿 5-氟-2-甲酰基苯酸水痘-帶狀皰疹病IgM抗體Elisa
冷海水黃桿 4-溴甲基四氫吡喃Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激Elisa
球孢白僵 六基鈷(II)鐵(II)酸乙型肝炎病E抗體Elisa
枯草芽孢桿斯氏亞種 二（六氟銻酸）三乙（五甲基環戊二烯基）銠（III）乙型肝炎病核心抗體Elisa
秦氏蜜環 曲安西龍肝再生增強因子Elisa
嗜鹽擬諾卡氏 C. I. 顏料紅 49糖化血紅蛋白A1cElisa
瘦弱鹽扁平 2,3-二氟苯重組高遷移率族蛋白B1Elisa
相思根瘤 2-氟-4-單純皰疹病2IgG抗體Elisa
美澳型核果褐腐病 2-溴-6-苯單純皰疹病2IgM抗體Elisa
米曲霉 6-氟-2-吡啶磺酰單純皰疹病6IgG抗體Elisa
白僵 2-甲氧基-3-氟-5-溴吡啶單純皰疹病6IgM抗體Elisa
溶壁（lywallzyme） 3-溴-2-甲氧基-5-三氟甲基吡啶單純皰疹病7IgG抗體Elisa
大腸埃希氏 Fmoc-Lys(5-FAM)-OH單純皰疹病7IgM抗體Elisa
美澳型核果褐腐病 3-溴-5-EB病IgG抗體Elisa
大腸埃希 十八烷基二甲基叔EB病IgM抗體Elisa
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