公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:神經(jīng)元CaMK-II抑制劑(KN-93)
英文名稱:KN-93
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:KN-93 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg KN-93是一種新穎的膜滲透的神經(jīng)元CaMK-II抑制劑,Ki值為370nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:139298-40-1 純度:98.79% 分子量:501.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
桔青霉磷化雌激受體α抗體Human FCHSD2 (F-BAR and double SH3 domains protein 2) ELISA KIT犬白介1β(IL-1β)免疫試劑盒
喜寒犁頭霉磷化真核翻譯起始因子4B抗體Human SLC30A3(Zinc transporter 3) ELISA Kit犬白介1α(IL1A)免疫試劑盒
胡椒枯萎病真核翻譯起始因子4B抗體Human EWSR1 (RNA-binding protein EWS) ELISA KIT犬白介18(IL-18)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌磷化轉錄接頭蛋白EP300抗體Human EXO5 (Exonuclease V) ELISA KIT犬白介15(IL15)免疫試劑盒
筆狀地霉磷化上皮癌轉化蛋白2抗體Human FCHO1 (F-BAR domain only protein 1) ELISA KIT犬白介11(IL-11)免疫試劑盒
大腸埃希菌磷化真核翻譯起始因子4G抗體Human FCHO2 (F-BAR domain only protein 2) ELISA KIT犬白介10(IL-10)免疫試劑盒
鏈霉菌表皮生長因子受體5抗體Human EXTL1 (Exostosin-like 1) ELISA KIT犬白介1(IL-1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌電子轉移黃蛋白β肽/黃蛋白抗體Human FERMT1 (Fermitin family homolog 1) ELISA KIT犬癌胚抗原(CEA)免疫試劑盒
黃芪葉桿菌鈉通道蛋白α ENaCHuman FLAD1 (FAD synthase) ELISA KIT犬γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
紅緣擬層孔菌轉錄因子E2F8抗體Human ESPL1 (Separin) ELISA KIT犬γ基丁(GABA)免疫試劑盒
運動張樹政氏菌內皮單核激活肽2抗體Human FTO(Alpha-ketoglutaRate-dependent dioxygenase FTO) ELISA Kit犬β內啡肽(β-EP)免疫試劑盒
奇異變形桿菌49005外基質蛋白2抗體Human FASTK (Fas-activated serine/threonine kinase) ELISA KIT犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫試劑盒
麥芽糖假絲酵母上皮膜蛋白3抗體Human EPS15 (Epidermal growth factor receptor substrate 15) ELISA KIT犬α-3干擾(IFN-α3)免疫試劑盒
新月彎孢膜蛋白EVC2抗體Human EPHB4 (Ephrin type-B receptor 4) ELISA KIT犬α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒
黃孢平革菌哺乳動物室管膜相關蛋白1抗體Human TUFM (Elongation factor Tu, mitochondrial) ELISA KIT犬α-1/2干擾(IFN-α1/2)免疫試劑盒
污黑腐皮殼內皮粘附分子抗體Human EEF2 (Elongation factor 2) ELISA KIT犬S100鈣結合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)免疫試劑盒
: No.28資源名稱: 產(chǎn)氣莢膜梭菌 質量規(guī)格:100μg/ml,u=4%茶黃-3-沒食子酯
環(huán)狀芽胞桿菌Bacillus│circulans 質量規(guī)格:10μg/ml,u=7%茶黃
細疣青霉Penicillium│verruculosun 質量規(guī)格:分析標準品補骨脂寧
神經(jīng)元CaMK-II抑制劑(KN-93)耐輻射奇球 腺苷-5′-二磷酸 鈉鹽嗜酸性粒陽離子蛋白Elisa
孤獨浜本酵母 4-苯乙烯單核趨化蛋白4Elisa
球形酸芽孢桿 N-Boc-反式-4-氟-L-脯酸甲酯多形核白彈性蛋白Elisa
約氏不動桿 N-Boc-4,4-二氟-L氨酸甲酯巨噬炎癥蛋白-1βElisa
果生鏈核盤 3-苯基肺部活化調節(jié)趨化因子Elisa
Fmoc-L-beta-高谷 6-叔丁酯表面活性蛋白DElisa
玉米細性枯萎病 2H-1,3-苯并噁-2,4(3H)-二酮克拉拉蛋白Elisa
葉點霉屬 氘代甲苯-d8β-防御2Elisa
乳桿屬 2-氨基-5-溴苯并噻唑核因子κBElisa
間型腐霉 布雷非德 A二肽基肽VIElisa
羊泰勒蟲(張家川株-2) 2,4,5-三溴咪唑巨噬炎性蛋白-1αElisa
大豆慢生根瘤 3,4-二甲氧基脂肪酸合成Elisa
秦氏蜜環(huán) 1-丁基吡啶四氟酸鹽腺相關病8Elisa
豌豆根瘤 D-精氨酰腺相關病8抗體Elisa
霍利斯格里蒙 4-溴-3,5-二氟苯Ⅲ型前膠原氨基末端肽Elisa