詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
1000T|5000T | 1~3天 |
商品介紹:
細胞膜染色試劑盒是用一種親脂性的綠色熒光探針進行細胞膜染色。染色液O 進入細胞膜后,在整個細胞膜上擴散,佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液O在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,被激發后可以發出綠色的熒光,具有很高的淬滅常數和激發態壽命。可以用標準的FITC濾光片檢測。 染色液O 通常不會明顯影響細胞的活力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。 儲存條件:4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。 有效期:六個月。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
雷公藤內酯(標準品)英文名稱: Tantalum standard磷化gamma基丁B型受體1抗體包裝100mg
雷公藤內酯(標準品)英文名稱: lurium standard磷化谷受體2抗體包裝25g
雷公藤寧堿A英文名稱: Terbium standard磷化鳥苷調節蛋白12抗體包裝5g
雷公藤乙(標準品)英文名稱: Vanadium solution珠蛋白轉錄因子1抗體包裝10g
類葉升麻苷,毛蕊花糖苷(標準品)英文名稱: Yttrium standard過氧化3包裝1g
藜蘆英文名稱: Zinc standard過氧化4抗體包裝1g
里卡靈A英文名稱: Zinc standard高爾基體膜蛋白GP73抗體包裝5g
利卡靈-B;利卡靈B英文名稱: Vamidothion standard solutionG蛋白偶聯受體172B抗體包裝1g
利血平(標準品)英文名稱: Vacuum pump oil生發中心B淋巴相關蛋白2抗體包裝1g
櫟櫻(標準品)英文名稱: Vacuum pump oilG蛋白轉錄因子α3抗體包裝5g
連錢草(標準品)英文名稱: Vacuum pump oilG蛋白偶聯受體124抗體(腫瘤血管內皮標記物)包裝10ml
連翹(標準品)英文名稱: Vacuum pump oil半乳糖凝集1抗體包裝50ml
連翹苷(標準品)英文名稱: Violuric acid monohydrateα葡萄糖苷2抗體包裝25g
連翹酯苷A(標準品)英文名稱: Vitamin E acetate半乳糖凝集7抗體包裝25g
連翹酯苷B(標準品)英文名稱: Uniconazole特異性囊腫病液體蛋白15抗體包裝5g
: LMG20263=DSM40172=ATCC19805=ATCC19921=CBS5資源名稱: 玫瑰暗黃鏈霉菌 質量規格:HPLC>98%,標準品羥基戊二單酰還原試劑盒牡荊內酯;Vitexilactone
44409T資源名稱: Amycolatopsis keratiniphila subsp. keratiniphila 質量規格:>99%羥基戊二單酰試劑盒毛地黃;Digitaline
傳染性喉氣管炎病毒Alphaherpesvirinae│Infectious laryngotracheitis virus 質量規格:HPLC>98%,標準品羥基賴正己試劑盒麥芽糖;Maltose
細胞膜染色試劑盒(綠色熒光)-M01閃光須霉 醋酸磺米隆CC趨化因子配體23Elisa
金灰青霉 5-溴-4-氯-3-辛酯辣椒Elisa
紅曲紅曲 1-羥基蒽醌速激肽Elisa
分枝卷霉 (S)-(+)-聯萘酚二對甲苯磺酸酯唇腭裂跨膜蛋白1樣蛋白Elisa
溶藻弧 3-(甲氨基)6磷酸果糖激1Elisa
豇豆慢生根瘤 1,3,5-三(N,N-二苯基氨基)苯防御α1Elisa
豬鏈球 4-甲基-3-氧代-N-苯基-2-(苯甲烯基)戊酰骨成型蛋白Elisa
成團泛 (1,5-環辛二烯)二鉑(II)可溶性甘露糖結合凝集2Elisa
孟氏假單胞 Prussian blue soluble膜受體蛋白Elisa
屎腸球 2-溴-4,5,6-三氟苯網狀蛋白4Elisa
硬結節桿 三(4 -甲氧基- 3 ,5 -二甲苯基)膦網狀蛋白4BElisa
Massilia dura (R,R)-N,N'-雙(三氟磺酰)-1,2-二苯基乙二含主要協助轉運蛋白超家族域蛋白2AElisa
宇佐美曲霉 阿侖膦酸鈉NDUFB4Elisa
中慢生華癸根瘤 2,3-二氟苯乙NDUFB8Elisa
島生坂野酵母 硒化銦(III)磷酸化過氧化物體增殖因子活化受體γElisa