詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Vadimezan | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
DMXAA是一種競爭性DT-diaphorase抑制劑,Ki值為20μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:117570-53-3 別名:ASA-404 純度:99.19% 分子量:282.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
綠色木霉磷脂酰肌激p85β抗體Anti-BMP5 Antibody(PB0729)α黑色激(α-MSH)
枯草芽孢桿菌磷化磷脂酰肌激p85β抗體Anti-BMP5 AntibodyαS轉移(α-GST)
簡單青霉磷化蛋白磷2C亞型α抗體Anti-BMP7 Antibodyα干擾(IFN-α)
釀酒酵母三磷腺苷受體受體P2X2抗體Anti-BMP6 Antibody(PB0730)α輔肌動蛋白4(ACTN-4)
釀酒酵母磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-BMPR1A Antibodyα-輔肌動蛋白3(ACTN-3)
枯草芽孢桿菌多型性腺瘤基因1蛋白抗體Anti-BMPR1B Antibodyα輔肌動蛋白3(ACTN-3)
二年輕泰坦桿菌撲克蒙蛋白抗體Anti-BMPR1B Antibody(PB0556)α輔肌動蛋白1(ACTN-1)
PET28a-TEVCASP抗體Anti-BMPR2 Antibodyα防御4(NP-4)
傳染性牛鼻氣管炎病絲/蘇激蛋白PIM1+PIM3抗體Anti-BNIP3 Antibodyα淀粉(AMY1)
光隧霉北里孢菌胞漿蛋白PACSIN3抗體Anti-BRAF Antibodyα淀粉(AMS/AMY)
黑曲霉跨膜接頭蛋白PAG抗體Anti-BNIP3 Antibodyα半乳糖基抗體(Gal)
根瘤菌PARD6G蛋白抗體Anti-BRAF Antibodyα半乳糖基(α-Gal)
頂青霉胎盤蛋白6抗體Anti-BRCA1 Antibodyα半乳糖苷(αGAL)
盧森坦類諾卡氏菌磷肌3激接頭蛋白1抗體Anti-BRCA1 AntibodyαN已酰基葡糖苷(αNAG)
豬丹絲菌PRAM1蛋白抗體Anti-BRCA2 AntibodyαL巖藻糖苷(AFU)
皮落青霉廣譜角蛋白PCK抗體Anti-BRCA1 Antibody(PB0016)αL艾杜糖苷(IDUA)
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BR
棲珊瑚假交替單胞菌Pseudoalteromonas│paragorgicola 質量規格:>98%,BR
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,BR
DT-diaphorase抑制劑(DMXAA)綠色木霉 改良克氏雙糖鐵培養基白介13Elisa
釀酒酵母 烯基基二硫白介15Elisa
彎孢 烯基二硫白介17AElisa
大腸埃希 三亞苯白介18Elisa
紫色鏈霉 2-氨基-5-氟吡啶白介1βElisa
滑假絲酵母 乙酰酮鈷(III)白介2Elisa
硬皮馬勃屬 4-甲苯三氟酸白介25Elisa
銹色野野村氏 2-甲基-1,3-(MPO)白介3Elisa
乳粉 沙門氏(陰性) 1,6-二己烷白介4Elisa
小卷霉 2,4,6-三氮酚白介5Elisa
露濕漆斑 N,N-二甲基烯基白介6Elisa
米根霉 3,5-二甲氧基甲酯白介8Elisa
運動節桿 4-氨基苯酸頻哪酯二Elisa
南類芽孢桿 (S, S)-環己二補體蛋白3Elisa
球孢白僵 2′-溴苯乙酮超氧化物歧化Elisa