商品介紹:
英文名稱:Capsaicin 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg Capsaicin是一種TRPV1激動(dòng)劑,作用HEK293細(xì)胞,EC50為0.29±0.05μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):404-86-4 別名:(E)-Capsaicin;8-Methyl-N-vanillyl-trans-6-nonenamide 純度:98.39% 分子量:305.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:TRPV1激動(dòng)劑(Capsaicin)
英文名稱:Capsaicin
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
香菇死亡相關(guān)蛋白6/Fas死亡區(qū)相關(guān)蛋白抗體Human LARP7(La-related protein 7) ELISA Kit人單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒
木生炭角菌動(dòng)力蛋白2抗體Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) ELISA Kit人單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
冷海水黃桿菌防御β2/Defensin β2抗體Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) ELISA Kit人單純皰疹病抗原-1(HSV-Ag1)免疫試劑盒
杏鮑菇多巴受體相互作用蛋白5抗體Human SORD(Sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅱ型抗體IgM(HSVⅡ-Ab)免疫試劑盒
乳酒假絲酵母性發(fā)育轉(zhuǎn)錄因子蛋白DMO抗體Human ZEB1(Zinc finger E-box-binding homeobox 1) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅱ型抗體IgG(HSVⅡ-Ab)免疫試劑盒
側(cè)耳無(wú)胸腺癥關(guān)鍵蛋白6樣抗體(迪格奧爾格綜合征)Human DTNBP1(Dysbindin) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgM)免疫試劑盒
蠟蚧菌軸絲動(dòng)力蛋白10抗體Human MTOR(Serine/threonine-protein kinase mTOR) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母D型天冬抗體Human ZEB2(Zinc finger E-box-binding homeobox 2) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgM)免疫試劑盒
繡球菌*DYDC1蛋白抗體Human OTC(Ornithine carbamoyltransferase, mitochondrial) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgG)免疫試劑盒
根瘤菌屬二氫嘧啶抗體Human CA3(Carbonic anhydrase 3) ELISA Kit人單氧化(MAO)免疫試劑盒
黑腐皮殼脫磷結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human ISG15(Ubiquitin-like protein ISG15) ELISA Kit人帶3蛋白(Band3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌DCST1蛋白抗體Human AMFR(E3 ubiquitin-protein ligase AMFR) ELISA Kit人大皰性類天皰瘡抗體(BP)免疫試劑盒
黑曲霉DCUN1D4蛋白抗體Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) ELISA Kit人大內(nèi)皮(Big ET-1)免疫試劑盒
土生類諾卡氏菌脫氧輔合蛋白抗體Human OCLN(Occludin) ELISA Kit人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)免疫試劑盒
鏈霉菌短鏈脫氫/還原家族4樣2蛋白抗體Human LARP7(La-related protein 7) ELISA Kit人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)免疫試劑盒
無(wú)花果曲霉DDRGK1蛋白抗體Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) ELISA Kit人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)免疫試劑盒
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于食品分析醋棉酚
幽門螺桿菌Helicobacter│pylori 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)柚皮苷二氫查爾
灰平鏈霉菌Streptomyces│griseoplanus Backus et al. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品山姜
TRPV1激動(dòng)劑(Capsaicin)歧異假絲酵母 1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽血清反應(yīng)因子Elisa
黑曲霉 乙烯基磺酸鈉肝吸蟲(chóng)Elisa
旋毛殼 1H,1H,2H-全氟-1-十二烯沙門氏抗體Elisa
黃暗青霉 芐氧乙酸視紫質(zhì)Elisa
雅致小克銀漢霉 3-巰基酸異辛酯酪氨酸羥化Elisa
固氮 5-溴噻唑癌標(biāo)志物-CA153Elisa
繩狀青霉 2-噻唑糖類抗原199Elisa
大腸埃希氏 2-溴-5-硝基噻唑克拉拉蛋白Elisa
黑曲霉 4-硝基咪唑白介36αElisa
褐囊蜜環(huán) 2-氨基-5-溴噻唑糜蛋白Elisa
堆形艾美耳球蟲(chóng) (S)-(-)-3-叔丁基氨基-1,2-血紅氧合1Elisa
小鵝瘟陽(yáng)性血清參考品(檢驗(yàn)用) 新亞銅試劑鹽酸鹽一水合物支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨Elisa
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 2,6-二羥基支鏈α-酮酸脫氨Elisa
枯草芽孢桿 1-乙酰基-5-溴-4--3-乙酯蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移Elisa
蠟狀芽孢桿 6,13-五并苯醌3-琥珀酰轉(zhuǎn)移1Elisa