詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:mTOR抑制劑(Deforolimus)
英文名稱:Deforolimus
產品規格:10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
Deforolimus是一種有效和選擇性mTOR抑制劑,在HT-1080細胞中抑制S6磷酸化的IC50值為0.2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:572924-54-0 別名:AP23573;MK-8669;Ridaforolimus 純度:98.46% 分子量:990.21 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
謝氏桿菌磷化蛋白激C抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)
蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)磷化蛋白激C抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)
嗜鹽棲鹽水芽孢桿菌磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)
腸道致病性大腸埃希氏菌磷化磷脂酰肌激催化亞單位A抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白(β2-GP)
虎掌菌1號*磷化磷脂酰肌激抗體Anti-BIRC7 Antibodyβ1,4-N-乙酰基半乳糖轉移2(B4GALNT2)
德里腐霉磷化磷脂酰肌激抗體Anti-BMI1 Antibodyα烯化(αENOL)
林芝假絲酵母磷化蛋白激C抗體Anti-BMI1 Antibodyα烯化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)
褐孢大禿馬勃磷化蛋白激C抗體Anti-BIRC7 Antibodyα突觸核蛋白(α-SYN)
微小桿菌磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體Anti-BMP15 Antibodyα戊二脫氫(α-KGDHC)
香菇蛋白酪磷1C抗體Anti-BMP2 Antibodyα乳清蛋白(α-La)
鏈霉菌磷化蛋白酪磷1C抗體Anti-BMP4 Antibodyα葡萄糖苷(α-glucosidase)
矮小傘枝霉磷化蛋白酪磷1C抗體Anti-BMP2 Antibody(PB0727)α葡萄糖苷(α-Glu)
大腸埃希菌磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體Anti-BMP15 Antibodyα平滑肌肌動蛋白(α-SMA)
單梗頭孢霉屬磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體Anti-BMP4 Antibodyα-內肽(α-EP)
毛尖蘑磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體Anti-BMP4 Antibodyα肌動蛋白(α Actin)
Virgibacillus磷化蛋白激C theta抗體Anti-BMP5 Antibodyα橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)
巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質量規格:>98%,BR
秀珍菇Pleurotus│geesterani Singer 質量規格:HPLC≥98%,標準品
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:>99%,BR,無物
mTOR抑制劑(Deforolimus)釀酒酵母 單增李斯特氏成套生化鑒定管6酮前列腺F1aElisa
糙孢籃狀 含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)Bcl-2相關X蛋白Elisa
葡萄汁酵母 萘啶酮酸Bcl-2相關死亡促進因子Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)B瘤因子2Elisa
新疆黃桿 OXA添加劑CXC趨化因子配體16Elisa
中國蜜環 緩沖李氏增肉湯基礎添加劑C-反應蛋白Elisa
淡色叢赤殼 LPM瓊脂添加劑P物質Elisa
金華戈登氏 FB1(Half-Fraser)添加劑β2微球蛋白Elisa
反硝化無色桿 FB1(Half-Fraser)添加劑(A、B)γ干擾Elisa
釀酒酵母 液體沙氏培養基γ干擾誘導單核因子Elisa
綠木霉 沙氏瓊脂培養基白三烯B4Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 緩沖動力-硝酸鹽培養基白三烯D4Elisa
白僵 WILKINS-CHALGREN瓊脂白介1Elisa
枯草芽孢桿 MCP瓊脂白介10Elisa
銅綠假單胞 4-氨基-3-苯白介12Elisa