詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:微管聚合和HIF-1抑制劑
英文名稱:2-Methoxyestradiol
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
2-Methoxyestradiol是一種microtubule和HIF-1抑制劑,在秋水仙堿位點或附近結合到tubulin,且抑制微管聚合,通過干擾正常微管功能而發揮作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:362-07-2 別名:2-ME2;NSC-659853 純度:99.54% 分子量:302.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
比阿婁維扎青霉 磷化淋巴特異性蛋白酪激抗體Human PKD2L1 ELISA Kit因子信號轉導抑制因子1(SOCS-1)
枯草芽孢桿菌膜相關蛋白酪激Lyn抗體Human PIWIL2 ELISA Kit纖維連接蛋白(cFn)
黑腐皮殼磷化膜相關蛋白酪激Lyn抗體Human PIP5K1A ELISA Kit外基質磷糖蛋白(MEPE)
解脂假絲酵母磷化膜相關蛋白酪激Lyn抗體Human PJA1 ELISA Kit色P450c21B/21-羥化(CYP21B)
洛格酵母腦瘤相關基因抗體Human PIP5K1B ELISA Kit色P450c21A/21-羥化(CYP21A)
香菇大腦邊緣系統相關膜蛋白抗體Human PIP5K3 ELISA Kit色P450(CYP450)
相思根瘤菌神經突觸粘附樣分子1抗體Human PIP5KL1 ELISA Kit色c氧化Ⅵα亞基多肽1(COX6A1)
大腸埃希氏桿菌富含亮重復序列/Ⅲ型纖維連接蛋白4抗體Human PITPNA ELISA Kit色C氧化(COX)
球孢白僵菌層粘蛋白α4抗體(Lamininα4)Human PIR ELISA Kit色C-1(CYC1)
釀酒酵母層粘蛋白α4抗體(Lamininα4)Human PITPNB ELISA Kit色C(Cyt-C)
鏈霉菌 (灰褐類群)脂質運載蛋白1抗體Human PIGT ELISA Kit色b561(cytb561)
天藍色鏈霉菌淋巴趨化因子抗體Human PIGS ELISA Kit絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)
產短桿菌低密度脂蛋白受體5樣蛋白抗體Human PIGZ ELISA Kit絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)
根瘤菌富含亮重復跨膜神經元蛋白3抗體Human PIH1D1 ELISA Kit膜表面免疫球蛋白(SmIg)
單色革蓋菌扁豆凝集Human PIK3C2G ELISA Kit膜DNA抗體(cmDNA)
卷枝毛霉磷化富亮重復激2抗體Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質量規格:>98.0%(HPLC)(T)貝母乙
暫無Prolixibacter│sp. 質量規格:>98.0%(HPLC)貝母
蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質量規格:>99.0%(HPLC)(T)2,3,5,4-四羥基二乙烯葡萄糖苷
微管聚合和HIF-1抑制劑 4-甲基聯苯環氧合Elisa
黑曲霉 2-異基苯心水病抗原Elisa
白僵 雙(2-嗎啉二乙基)(DMDEE)狀瘤病Elisa
擬柱形德克斯酵母 2,5-二氟苯T調節因子1Elisa
死海鹽盒 1-溴-2,6-二氟苯直接膽紅Elisa
芽孢桿屬 9-蒽總膽紅Elisa
釀酒酵母 2-氟-5-甲間接膽紅Elisa
黃薄孔 脫氫乙酸 鈉鹽 一水合物膽酸Elisa
德氏乳桿保加利亞亞種 (S)-(+)-2-(苯基)吡咯烷谷草轉氨Elisa
魯氏接合酵母 三苯基化錫磷脂Elisa
大腸埃希 三十烷異檸檬酸脫氫Elisa
青霉 二十三烷NADH脫氫復合物Elisa
青霉屬 三聚硫酸酮酸羧化Elisa
棲異地克雷伯氏 乙基叔丁基神經肽YElisa
黑球漆斑 1,4-環己二酮膽囊收縮Elisa