詳細介紹
商品介紹:
用途: 膠原纖維染色,簡稱V.G染色液 注意事項: 臨用時飽和PA溶液:酸性復紅=9:1混合后使用。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
蟲草(標準品)英文名稱: ZSTK474;ZSTK-474整合α3抗體包裝5g
臭靈丹(標準品)英文名稱: Luteolin 7-O-glucuronide整合β5抗體包裝1g
臭梧桐葉(標準品)英文名稱: Ganetespib整合α1抗體包裝250mg
川貝母(標準品)英文名稱: Lucidenic acid D白介2受體β鏈抗體 IL-2Rβ包裝5g
川陳皮(標準品)英文名稱: DAPT (GSI-IX)干擾α2b抗體包裝25ml
川燈心草(標準品)英文名稱: Lucidenic acid E誘導協同激分子配體CD275抗體包裝5ml
川楝(標準品)英文名稱: Licofelone雞傳染性法氏囊病病抗體包裝100g
川楝子(標準品)英文名稱: Ganoderenic acid C白介-17抗體包裝25g
川麥冬苷A英文名稱: Biocytin5'肌苷磷脫氫2抗體包裝100g
川木通(標準品)英文名稱: PUH71即刻早期應答基因5樣蛋白抗體包裝25g
川木香(標準品)英文名稱: Orotic acid整合αV抗體包裝500g
川牛膝(標準品)英文名稱: Niflumic acid白介-19抗體包裝25g
川射干(標準品)英文名稱: XYLAN白介3抗體包裝5g
川烏(標準品)英文名稱: Atrazine白介3受體a鏈抗體包裝250mg
川西獐牙菜(標準品)英文名稱: Bufexamac白介-5受體α鏈抗體IL-5Rα包裝1g
: E-3資源名稱: O1群霍亂弧菌 質量規格:HPLC>98.5%,標準品可溶性補體激活產物SC5b9 黃豆黃;Glycitein
紫色鏈霉菌Streptomyces│violaceus 質量規格:>99%可溶性白介7受體試劑盒黃芪皂苷II;astragaloside
蕓薹鏈格孢Alternaria│brassicae (Berk.) Sacc. 質量規格:>98%,分析標準品可溶性P選擇試劑盒黃芪皂苷III;Astragalosid
VG染色液蠟狀芽孢桿 1-(3,4-二)哌酮戊二酸脫氫Elisa
弗氏志賀氏 2-羥基-4,5-二甲氧基原葉綠酸酯氧化還原Elisa
美澳型核果褐腐病 2,2-二甲基環原葉綠酸酯氧化還原AElisa
藤黃微球 N-(4-氨基-3-甲氧基苯基)甲磺酰二氫類黃酮還原Elisa
單核增生李斯特CMCC(B)54002 Palbociclib過氧化還原5Elisa
綠穗霉 5-吡啶-3-基-1,3,4-惡二唑-2-組蛋白Elisa
尼氏芽孢桿 1H-咪唑-4-甲ACC合成Elisa
漢遜德巴利酵母fabryi變種 3-氯-4-羥基甲酯ACC氧化Elisa
香菇(泌陽3號) 2,4,6-氧基β-葡萄糖苷酸Elisa
球孢白僵 5-氯-1-甲基 吡唑-4-羧酸乙酯丁酸Elisa
平臍蠕孢 4-溴-2,3-二氯苯乳糖Elisa
空泡單胞 4-氯-3-羥基苯甲順式還原酮加雙氧1Elisa
產氣腸桿(現1) 2-氯-4-羥基苯甲羥基酮酸還原Elisa
布魯氏 2,4-二氯-5-甲基吡啶蛋白質Elisa
不規則鹽海 2-氯-5-羥基維生BElisa