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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
鈣離子檢測試劑盒采用Fluo-3,AM 細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針檢測鈣離子。 Fluo-3,AM穿透細胞膜進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3，從而被滯留在細胞內(nèi)。 Fluo-3 游離配體幾乎是非熒光性的，其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。但是，當它與細胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強的熒光，熒光會增加60 至100 倍，大激發(fā)波長為506nm，大發(fā)射波長為 526nm。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm 左右，發(fā)射波長為 525～530nm。可以使用熒光顯微鏡、酶標儀、激光共聚焦顯微鏡或流式細胞儀檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。 儲存條件：-20℃避光保存。 有效期：一年。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
狼(狼大戟)（標準品）英文名稱： Dacthal顆粒A抗體包裝5g
狼（月腺大戟）（標準品）英文名稱： 1-Chlorooctane顆粒D/B/E/N/G/F/H抗體包裝25g
狼乙（標準品）英文名稱： Dodecane粒-巨噬集落激因子3受體抗體包裝5g
老鸛草（標準品）英文名稱： Bismuth solution血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體包裝1g
老鶴草（標準品）英文名稱： Copper solutionG蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝25g
老龍皮；網(wǎng)脊衣 A（標準品）英文名稱： Copper solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR63蛋白抗體包裝5g
老蛇蓮（標準品）英文名稱： Cobalt standard磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝250mg
酪(標準品)英文名稱： Chromium StandardG蛋白偶聯(lián)受體109A抗體包裝1g
雷酚內(nèi)酯（標準品）英文名稱： Erbium standardG蛋白偶聯(lián)受體15抗體包裝5g
雷公藤春堿英文名稱： Gold solution粒-巨噬集落激因子受體β抗體包裝1g
雷公藤次堿(標準品)英文名稱： Iridium standard solution生長停滯特異性蛋白8抗體包裝5g
雷公藤定堿英文名稱： Nickel standardG蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體包裝1g
雷公藤紅(標準品)英文名稱： Potassium standard磷脂酰基蛋白聚糖-5抗體包裝100g
雷公藤(標準品)英文名稱： Praseodymium standardGADD45γ相互作用蛋白1抗體包裝25g
雷公藤晉堿英文名稱： Tungsten solutionGTP結(jié)合蛋白4抗體（慢性腎功能衰竭蛋白）包裝5g
紫色小單孢菌Micromonospora│violacea 質(zhì)量規(guī)格：>98%,半合物橋粒糖蛋白2試劑盒米力農(nóng);Milrinone
: ivcas7.00075資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品羥賴糖苷試劑盒馬兜鈴;Aristolone
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>97%,USP grade羥賴試劑盒馬兜鈴B;Aristolochic a
Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)自養(yǎng)假諾卡氏 4-硝基-7-哌-2,1,3-苯并惡二唑[用于高效液相色譜標記]白介14Elisa
冷海水黃桿 N,N'-二(萘-2-基)-N,N'-二(苯基)聯(lián)苯-4,4'-二程序性死亡配體-1抗體Elisa
野油菜黃單胞棲絨毛致病變種 Fmoc-D-3-(1-萘基)氨酸叉頭框蛋白N3Elisa
紅酵母 溴化釓(III)鈉轉(zhuǎn)運體抗體Elisa
釀酒酵母 1-氯甲酸芴甲酯-(S)-吖丁啶-2-羧酸鈉轉(zhuǎn)運體Elisa
半膠蘑菇(暫定名) 2,4,6-環(huán)庚三烯-1-甲黃色葡萄球的Cas9核酸Elisa
拜耳接合酵母 2,5-二乙酸黃色葡萄球的Cas9核酸抗體Elisa
Promicromonospora Val-Ser環(huán)形交叉軸突導(dǎo)向受體同源物4Elisa
擬香味類香味 4-甲氧基-1-茚酮天冬酰內(nèi)肽Elisa
沙氏芽孢桿 Go 6983TCF4Elisa
姬松茸* 環(huán)氧烯縮二乙正絲氨酸蛋白抑制劑E2Elisa
釀酒酵母 2,2′-[(4，s)-4-苯基-2-噁唑啉]水痘帶狀皰疹病gE抗體Elisa
熱帶假絲酵母 2-己基環(huán)戊酮補體片段4dElisa
樟疫霉 L-乙硫氨酸補體片段4aElisa
檸檬色葡萄球 4-氯吡啶-2-羧酸叔丁酯集落激因子1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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