詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:細胞凋亡形態學檢測試劑盒
英文名稱:Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
產品規格:100T
發貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit 產品規格:100T 形態學檢測是研究細胞凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態學變化是多階段的,起初,細胞間連接和微絨毛消失,細胞體積縮小,胞漿凝縮,內質網變疏松并與胞膜融合,形成一個個空泡,核糖體與線粒體等細胞器聚集,結構尚無明顯改變,細胞核內的染色質逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細胞核固縮呈均一的致密物,進而斷裂成碎塊,此時細胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個細胞變成數個大小不等的有膜包裹的凋亡小體:后凋亡小體被周圍具有吞噬能力的細胞吞噬、消化。上述這些形態學的變化,可以通過本試劑盒中的染色及光學顯微鏡觀察。 計算細胞凋亡率和死亡率: 細胞凋亡率=凋亡細胞/細胞總數×100% 細胞死亡率=壞死細胞/細胞總數×100% 儲存:RT,避光,有效期12個月。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
芽孢桿菌分裂周期2樣蛋白激5抗體Human EIF5B ELISA Kit兔載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒
山柑芽孢桿菌CD20樣蛋白抗體(造血干4跨膜蛋白3)Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) ELISA Kit兔載脂蛋白A1(apo-A1)免疫試劑盒
假單胞菌屬周期蛋白依賴性激CABLES1抗體Human ELP4 ELISA Kit兔誘導型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒
繩狀籃狀菌分裂周期相關蛋白3抗體Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) ELISA Kit兔游離睪(F-TESTO)免疫試劑盒
Bacillus 卷曲螺旋結構域蛋白148抗體Human ELMOD2 ELISA Kit兔抑瘤M(OSM)免疫試劑盒
金針菇—HP3卷曲螺旋結構域蛋白153抗體Human EIF5A(Eukaryotic translation initiation factor 5A-1) ELISA Kit兔乙酰化饑餓激(aGHRL)免疫試劑盒
黑孢霉卷曲螺旋結構域蛋白160抗體Human ELOF1 ELISA Kit兔乙酰酯(AChE)免疫試劑盒
大腸埃希菌卷曲螺旋結構域蛋白22抗體Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) ELISA Kit兔乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌卷曲螺旋結構域蛋白25抗體Human ELP4 ELISA Kit兔乙酰(ACh)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結構域蛋白28A抗體Human EIF5B ELISA Kit兔胰淀(Amylin)免疫試劑盒
瓜亡革菌卷曲螺旋結構域蛋白28B抗體Human EMB ELISA Kit兔一氧化氮合成(NOS)免疫試劑盒
平菇腫瘤/抗原74抗體Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) ELISA Kit兔一氧化氮(NO)免疫試劑盒
木糖葡糖醋桿菌卷曲螺旋結構域蛋白38抗體Human EMG1 ELISA Kit兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒
釀酒酵母7號染色體開放閱讀框72抗體Human EIF3M ELISA Kit兔血小板選擇,P -選擇免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌卷曲螺旋結構域蛋白42抗體Human EIF4A2 ELISA Kit兔血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
鼠傷寒沙門氏菌卷曲螺旋結構域蛋白47抗體Human ELAC2 ELISA Kit兔血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
猴頭菇Hericium erinaceus (Bull.) Pers. 質量規格:>98%,BRSMAD3 木栓
AS2.126資源名稱: 釀酒酵母 質量規格:>98%,BRSMAD2 麻醉椒苫
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:Ind GradeSHC轉化蛋白1試劑盒茅蒼術
細胞凋亡形態學檢測試劑盒多主葡萄殼 Nε-CBZ-L-賴氨酸芐酯鹽酸鹽黑濃集Elisa
維氏紅細 2.6-二氟-4-甲氧基苯酸紅生成Elisa
靈芝(紅芝, 赤芝) 2,5-二苯甲琥珀酸脫氫Elisa
球孢白僵 4--2,5-二甲氧基苯花生四烯酸Elisa
圣保羅沙門氏 2.6-二苯酸環孢AElisa
鹽反硝化枝芽孢桿 5-喹啉環磷酸鳥苷Elisa
綠色粘帚霉 5-甲基-4,6-二羥基嘧啶環磷酸腺苷Elisa
金黃色葡萄球 2 -苯乙基 β-D -半乳糖苷環氧合1Elisa
高地芽孢桿 噻吩-α-磺酰環氧合2Elisa
小平菇(秀珍菇) 2,3-二苯酸緩激肽Elisa
蘇云金芽孢桿 2,6-二溴蒽醌緩激肽受體B2Elisa
鼠乳桿 3,5-二苯肼鹽酸鹽氧化Elisa
Starmerella sp. 2,6-二氟吡啶-3-酸黃腺嘌呤二核苷酸Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 D-氨酸乙酯鹽酸鹽黃體生成Elisa
樟疫霉 6-溴靛紅黃體生成釋放Elisa