商品介紹:
PIK-75是p110α抑制劑,IC50為5.8nM,比對p110β的抑制性強200倍,還能抑制DNA-PK,IC50為2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:372196-77-5 別名:PIK-75 Hydrochloride 純度:99.91% 分子量:488.74 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:p110α抑制劑(PIK-75)
英文名稱:PIK-75
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鞘單胞菌減數(shù)分裂重組蛋白SPO11抗體Anti-PARP1 Antibody(PB0343)磷泛酰半胱脫羧(PPCDC)
牛布魯氏菌病間接ELISA抗體Smad蛋白E3泛連接1抗體Anti-PARVA Antibody磷泛酰半胱合成(PPCS)
褐色馬勃鈉通道亞基β4抗體Anti-PAX1 Antibody磷二酯9A(PDE9A)
戊糖乳桿菌基質(zhì)交感分子1抗體Anti-PAX2 Antibody(PB0776)磷二酯8B(PDE8B)
雅致小克銀漢血清淀粉樣蛋白4抗體Anti-PAX3 Antibody磷二酯8A(PDE8A)
雙鞘不黏柄菌外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體Anti-PAX4 Antibody磷二酯7B(PDE7B)
擬莖點霉SLU7蛋白抗體Anti-PAX5 Antibody磷二酯7A(PDE7A)
巨型艾美耳球蟲信號肽肽SPP抗體Anti-PAX6 Antibody(PB0821)磷二酯4D(PDE4D)
亞熱帶細小鏈孢菌類固5α還原1抗體(5α-Reductase 1)Anti-PCDH15 Antibody磷二酯12(PDE12)
金黃色葡萄球菌蘋果14-3-3蛋白抗體(植物)Anti-PAX8 Antibody磷二酯11A(PDE11A)
溜曲霉角質(zhì)蛋白α抗體Anti-PBK Antibody磷二酯10A(PDE10A)
中國臺灣根霉角質(zhì)蛋白β抗體Anti-PCK1/PEPC Antibody淋巴趨化因子(Lptn)
肉糜 鵝源性成分(定性)粘附分子伴侶蛋白1抗體Anti-PCK2 Antibody淋巴抗原96(LY96)
淡紫擬青霉粘附分子伴侶蛋白2抗體Anti-PCSK1 Antibody淋巴抗原9(LY9)
皮落青霉低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體Anti-PCSK4 Antibody淋巴抗原86(LY86)
杏鮑菇琥珀色亞基B560抗體Anti-PCSK9 Antibody淋巴抗原75(LY75)
新的飽食分子蛋白抗體腸膜明串珠乳脂亞種人腦成纖維細胞提取物
NUP54抗體水雷夫松氏菌人腦動脈血管平滑肌細胞提取物
NADPHoxidase3抗體佐久氏沙雷氏菌人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞提取物
NADPH氧化NOX家族的成員4抗體頭葡萄球菌頭亞種人神經(jīng)元細胞提取物
p110α抑制劑(PIK-75)日本根霉 2-乙酰α葡萄糖苷Elisa
釀酒酵母 托品酮促性腺抑制Elisa
少根根霉 雌三磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
漢遜德巴利酵母 犬尿喹啉酸磷酸化蛋白激AElisa
榆黃菇 β-Tocotrienol增殖相關(guān)蛋白Elisa
香菇 3-甲基鄰苯二酚叉頭蛋白L2Elisa
芽孢桿屬 1-氨基茚滿類固生成因子1Elisa
哈茨木霉 SorafenibDoublesex和Mab-3相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Elisa
科赫芽胞桿 Sorafenib叉頭型基因P3Elisa
大腸埃希 Canertinib (CI-1033)腺苷酸環(huán)化Elisa
釀酒酵母 遠志酸擴張性共濟失調(diào)突變因子Elisa
疣梗青霉 α-托品半胱氨酸雙加氧Elisa
變異鏈球 咖啡酸苯乙酯半胱亞磺酸脫羧Elisa
蠟樣芽孢桿 水蘇四糖,四水維生DElisa
三方氏酵母 α-松脂交替氧化Elisa