標準革蘭氏染色液公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-HSL (Ser563) /FITC 熒光標記化荷爾蒙敏感脂肪抗體IgG鈣鎂試劑 Indicator
Phospho-HSL (Ser565) /FITC 熒光標記化荷爾蒙敏感脂肪抗體IgG間酚 Standard for GC,≥99.7%(GC)
Phospho-HSL (Ser660)/FITC 熒光標記化荷爾蒙敏感脂肪抗體IgG變色

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
英文名稱： 2-Phenylacetamide早期發(fā)育調(diào)控蛋白2抗體包裝100g

呋塞米（速尿）英文名稱： Enoxacin磷酯Cβ3包裝25g

咪唑英文名稱： [Nle4,DPhe7] a-MSH, amide; Melanotan I血小板源性生長因子A抗體包裝100mg

芬那,滅英文名稱： [Nle8’18,Tyr34]-pTH (1-34) amide (bovine)特異性核苷果糖β抗體包裝500mg

喹英文名稱： [Nle8’18,Tyr34]-pTH (3-34) amide (bovine)11號染色體開放閱讀框73抗體包裝25mg

馬西尼/馬澤尼英文名稱： [Nle8’18,Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)磷乙轉(zhuǎn)移A抗體包裝100ml

尼辛葡英文名稱： [Phe2,Orn8]-Oxytocin前列環(huán)受體抗體包裝1g

派利多,哌利多英文名稱： [Ser4,Ile8]-Oxytocin原鈣粘蛋白7抗體包裝5g

他英文名稱： [Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)過氧化物膜蛋白1抗體包裝1mg

福美斯坦英文名稱： [Trp4]-Kemptide橋粒斑菲蛋白2抗體包裝100ml

福莫特羅英文名稱： [Tyr8] Bradykinin胞粘蛋白結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝25ml

福沙吡坦二葡(MK-0517)英文名稱： [Tyr9]- β-MSH (porcine)絲/蘇蛋白激PCTK2抗體包裝100g

福辛普利鈉英文名稱： α-ANF(1-28), human磷二酯7抗體包裝25g

富馬福莫特羅 (二）英文名稱： α-MSH磷二酯7B抗體包裝5g

富馬福莫特羅(無)英文名稱： β-Amyloid Peptide (1-42), human先天性眼外肌纖維化相關(guān)蛋白FEOM2抗體包裝100mg

日本曲霉Aspergillus│japonicus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BR黃體生成試劑盒表沒食子兒茶沒食子酯;(-)-Epi

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品氧化試劑盒表兒茶沒食子酯;(-)-Epicat

亞金黃粘蓋牛肝菌Suillus│subaureus (Peck) Snell 質(zhì)量規(guī)格：>95%環(huán)磷腺苷試劑盒表沒食子兒茶;(-)-Epigallo
標準革蘭氏染色液果生鏈核盤 2-溴苯甲酰肽基脯氨酰異構(gòu)AElisa

貝氏葡萄座腔 2-甲基噻唑-5-羧酸白介17EElisa

焦曲霉 6-甲基-2-異煙酸甲酯蛋白酪氨酸磷酸Elisa

華盛頓腥擲孢 2--3-硝基三氟甲苯促胰島生長Elisa

運動發(fā)酵單孢（現(xiàn)1） 2-氟-4-甲βElisa

虎掌* 4-氟-2-甲膽囊收縮Elisa

水鹽單胞屬 1-甲基-4-硝基吡唑轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白Elisa

殼 2--4-氟乙酰苯過氧亞硝基陰離子Elisa

弗吉尼亞鏈霉 3-吡啶乙酸乙酯1-3-β-D葡聚糖Elisa

粟酒裂殖酵母 N-甲基-2-氟芐琥珀酸；丁二酸Elisa

多主葡萄殼 3,6-二溴-2-2，3-二磷酸甘油酸Elisa

灰葡萄孢（灰霉病） 2-甲基-4,6-二-5-氨基嘧啶未飽和鐵結(jié)合力Elisa

Havobacterium 2-氨基-4-(3,4-二)噻唑胰島受體底物1Elisa

綠色木霉 2,5-二氟乙酰苯丁酸鈉Elisa

秸稈色假單胞 2-溴-3-促性腺釋放受體Elisa