產(chǎn)品屬性:
中文名稱:FLAP抑制劑(MK-886)
英文名稱:MK-886
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
MK886是一個強(qiáng)的FLAP抑制劑,也是非競爭的PPAR alpha的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:118414-82-7 別名:L 663536 純度:99.70% 分子量:472.08 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
桿狀毛霉泛甲基賴抗體Anti-BCL2L1 Antibodyβ連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)
囊軸發(fā)仙菌囊軸亞種核糖體p70 S6蛋白激抗體Anti-BCL2L1 Antibodyβ-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)
微菌核鏈霉菌p53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體Anti-BCL2L1 Antibody(PB0964)β膠原交聯(lián)(bCTx)
須芒草伯克霍爾德氏菌Bcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體Anti-BCL2L2 Antibodyβ-肌動蛋白(β-actin)
樣品粉碎機(jī)磷脂爬行3抗體Anti-BCL6 Antibodyβ-黑色激(β-MSH)
產(chǎn)紫青霉骨骼肌線粒體膜蛋白PARL抗體Anti-BCL9L Antibodyβ黑色激(β-MSH)
大腸埃希菌多核苷磷化蛋白抗體Anti-BCRP/ABCG2 Antibodyβ干擾(IFN-β/IFNB)
蘑菇胃腸道相關(guān)酪激抗體(蛋白酪激5)Anti-BDH1 Antibodyβ甘露糖苷(β Manase)
Burkholderia anthinaPEST含核蛋白抗體Anti-BCMA/Tnfrsf17 Antibodyβ-防御3(β-BD-3)
枯草芽胞桿菌磷化p53結(jié)合蛋白1抗體Anti-BDKRB2 Antibodyβ-防御2(β-BD-2)
枯草芽孢桿菌蛋白磷2Cα抗體Anti-BCR Antibodyβ防御2(β-BD-2)
大孢鏈霉菌磷化樁蛋白Paxillin抗體Anti-BDNF Antibodyβ防御104(DEFB104A)
弧狀短波單胞菌神經(jīng)胞漿蛋白9.5抗體(蛋白基因產(chǎn)物9.5)Anti-BDNF Antibody(PB0013)β防御1(DEFB1)
根瘤菌磷化蛋白激Aβ抗體Anti-BECN1 Antibodyβ防御(β-Defensin)
秦氏蜜環(huán)菌蛋白激A受體2α亞基抗體Anti-BEST1 Antibodyβ淀粉樣前體蛋白(β-APP)
鏈球菌屬磷化蛋白激A受體2α亞基抗體Anti-BECN1 Antibody(PB0014)β淀粉樣多肽42(Aβ 42)
惡臭假單胞菌Pseudomonas│putida 質(zhì)量規(guī)格:>99%(T),標(biāo)準(zhǔn)品
多粘類芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
蟬花1-8Isaria│cicadae Miq. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
FLAP抑制劑(MK-886)毛木耳781 改良Skirrow瓊脂平板凝聚Elisa
米根霉 CIN-1瓊脂平板9cm基質(zhì)金屬蛋白抑制因子9Elisa
金黃色葡萄球金黃亞種 營養(yǎng)肉湯(GB/T20944.1-2007標(biāo)準(zhǔn))父系表達(dá)基因2Elisa
冷桿屬 1-萘甲外信號調(diào)節(jié)激Elisa
釀酒酵母 哥倫比亞血瓊脂平板9cmP38蛋白Elisa
果生鏈核盤 創(chuàng)傷弧成套生化鑒定管Janus激1Elisa
灰黃青霉 志賀氏成套生化鑒定管(ZHGB)非受體激2Elisa
金針菇—雜交19 CBZ-L-賴氨酸球蛋白G1Elisa
多主葡萄殼 大腸桿成套生化鑒定管球蛋白G2Elisa
枯草芽孢桿 變形桿成套生化鑒定管(BXWS)球蛋白G3Elisa
球毛殼 含225ml7.5%肉湯均質(zhì)袋球蛋白G4Elisa
巨獸芽孢桿 5,10,15,20-四(4-甲氧苯基)卟啉IRX5Elisa
點柄粘蓋牛肝 營養(yǎng)肉湯(NB)顆粒球蛋白G2aElisa
畢赤酵母 含100mlBolton肉湯均質(zhì)袋Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 營養(yǎng)瓊脂(NA)顆粒芐1Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)