詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
XL-647 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
XL-647(Tesevatinib;XL-647;KD-019)是多靶點酪氨酸激酶抑制劑;抑制EGFR,ErbB2,KDR,Flt4和EphB4激酶活性的IC50值分別為0.3,16,1.5,8.7,和1.4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:781613-23-8 別名:Tesevatinib;EXEL-7647;KD-019 純度:99.21% 分子量:491.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
香菇Cy5.5標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIL1 Antibody(PB0481)蛋白激Bα(PKBα)
噬瓊膠海水菌Cy7標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIM Antibody(PB0378)蛋白二硫鍵異構(PDI)
野葛頭孢霉PE標記的兔抗小鼠IgMAnti-VEGFD Antibody(PB0952)蛋白二硫化物異構A6(PDIA6)
黃發鏈霉菌Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgMAnti-VGF Antibody蛋白二硫化物異構A5(PDIA5)
熱紅短芽胞桿菌APC標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIP Antibody蛋白二硫化物異構A4(PDIA4)
騷動厄氏菌膠體金標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIP Antibody蛋白二硫化物異構A2(PDIA2)
枯草芽孢桿菌Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIPR1 Antibody蛋白Z依賴性蛋白抑制因子(ZPI)
淡紫紫霉Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠IgMAnti-VPS4B Antibody蛋白Z(PROZ)
綠蓋粉孢牛肝菌Cy3標記的兔抗小鼠IgMAnti-VRL1/TRPV2 Antibody蛋白S(PROS)
黑曲霉FITC標記的兔抗小鼠IgMAnti-VIPR1 Antibody蛋白O-巖藻糖基轉移2(POFUT2)
多主葡萄殼菌羅丹明標記的兔抗小鼠IgMAnti-VNN1 Antibody蛋白O-巖藻糖基轉移1(POFUT1)
平臍儒孢菌羅丹明標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VPS4A Antibody蛋白O-葡萄糖基轉移1(POGLUT1)
猴頭菌—50043復壯堿性磷(AP)標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VSX2 Antibody蛋白O-甘露糖基轉移2(POMT2)
甲酚斯魯夫酵母FITC標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VRK1 Antibody蛋白O-甘露糖基轉移1(POMT1)
產硫化物嗜鹽堿紅菌膠體金標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VTN Antibody蛋白L-異天冬-O-甲基轉移(PCMT1)
草青霉Cy3標記的兔抗小鼠k鏈Anti-VTCN1 Antibody蛋白C抑制因子(PCI)
天門冬甲基轉移PCMT抗體生孢梭菌 小鼠尿道組織提取物
絲/蘇蛋白激39抗體發根根瘤菌小鼠腎足突基底膜組織提取物
端粒保護蛋白1抗體粉紅單端孢霉小鼠腎組織提取物
腦3抗體皺褶青霉小鼠腎小管組織提取物
多靶點酪氨酸激酶抑制劑(XL-647)根瘤 黃華堿
暗黑鏈霉 β,β-二甲基烯酰紫草
金龜子綠僵 葫蘆IIA
淡紫擬青霉 五加苷D
大腸埃希 醋酸己定
長枝木霉 去氫茯苓酸
蒙塔涅梨孢假殼 甲基紫精
化血根堿
金針菇(毛柄、冬菇) 地弗地衣酸
太平洋萊茵海默氏 黃芪多糖
熊蜂生斯塔莫酵母 對氨基
紅冬孢酵母 多巴鹽酸鹽
釀酒酵母 青蒿琥酯
滑假絲酵母 去氫荷葉堿
嗜熱脂肪地芽孢桿 N-甲基荷葉堿