以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
商品介紹:
英文名稱:Volasertib 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Volasertib是一種高效的PLK1抑制劑,IC50值為0.87nM,同時能夠抑制Plk2和Plk3,IC50值分別為5和56nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:755038-65-4 別名:BI 6727 純度:98.76% 分子量:618.81 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
Litorilituus sediminis胞漿動力蛋白中間鏈2抗體Human IRF3(Interferon regulatory factor 3) ELISA Kit人蛋-R-亞砜還原 B2,線粒體(MSRB2/CBS-1/MSRB/CGI-131)免疫試劑盒
土芽胞桿菌抑癌蛋白DKK3抗體Human GUCY2C(Heat-stable enterotoxin receptor) ELISA Kit人彈性蛋白2,中性粒(ELA2)免疫試劑盒
米曲霉單克抗體Human BPIFA2(BPI fold-containing family A member 2) ELISA Kit人彈性蛋白(Elastase)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌腫瘤壞死因子配體超家族成員10CHuman MST1P9(Putative macrophage-stimulating protein MSTP9) ELISA Kit人彈性蛋白(ELN)免疫試劑盒
多粘類芽孢桿菌干擾誘導蛋白p58ipk抗體Human UTS2D(Urotensin-2B) ELISA Kit人膽(Cholic acid)免疫試劑盒
圍小叢殼轉錄調節因子DACH2抗體Human HIST1H4A(Histone H4) ELISA Kit人膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)免疫試劑盒
牡丹枝孢(牡丹葉霉病菌)穿膜蛋白DLK1抗體Human S100A7(Protein S100-A7) ELISA Kit人膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
紅酵母屬Dysferlin蛋白抗體Human CELA1(Chymotrypsin-like elastase family member 1) ELISA Kit人轉運體樣蛋白4(SLC44A4)免疫試劑盒
加拿大色鹽桿菌防御β2/Defensin β2抗體Human CALR(Calreticulin) ELISA Kit人乙酰轉移(ChAT)免疫試劑盒
小鏈霉菌死亡相關蛋白5抗體Human TRUB1(Probable tRNA pseudouridine synthase 1) ELISA Kit人膽紅氧化代謝物 免疫試劑盒
赭色擲孢酵母解旋DEAD5抗體Human PTEN(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase and dual-specificity protein phosphatase PTEN) ELISA Kit人膽固酯轉移蛋白(CETP)免疫試劑盒
大腸桿菌屬間粘附分子非整合蛋白3抗體Human SULT1A1(Sulfotransferase 1A1) ELISA Kit人膽固7α-羥化(CYP7A)免疫試劑盒
釀酒酵母Caspase 激活的脫氧核糖核抗體Human NDP(Norrin) ELISA Kit人膽固(CH)免疫試劑盒
木糖氧化無色桿菌死亡效應結構域蛋白1抗體Human QDPR(Dihydropteridine reductase) ELISA Kit人單絲蛋白激1(LIMK1)免疫試劑盒
栗疫菌死亡效應結構域蛋白2抗體Human HMGA1(High mobility group protein HMG-I/HMG-Y) ELISA Kit人單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒
*瓜果腐霉菌DNA聚合β抗體Human MMP19(Matrix metalloproteinase-19) ELISA Kit人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒
惡臭假單胞菌Pseudomonas│putida 質量規格:分析標準品,≥99.5% (GC)苔黑酚龍膽二糖苷
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:分析標準品,≥99.0%(GC)反式茴香腦
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:分析標準品法卡林二
PLK1抑制劑(Volasertib)Rhodococcus Val-Tyr心臟特異性同源盒轉錄因子NKX2.5Elisa
植物乳桿 Ala-Phe性脈絡叢腦膜炎病Elisa
叢毛單胞(可定) 1,4-二苯氧基苯呼腸孤病III型Elisa
金黃色葡萄球 (S)-(-)-1,2-環氧丁烷神經營養因子4Elisa
紫云英根瘤* 優降寧神經營養因子5Elisa
藤黃微球 L-天門冬氨酸-4-叔丁基酯神經營養因子6Elisa
巴斯德畢赤酵母 2,9-二乙酰鳥嘌呤抗紅抗體Elisa
地衣芽孢桿 3-溴-5-苯腫瘤壞死因子誘導基因6蛋白Elisa
單胞屬 2-烷磺酸鈉 一水GluD1Elisa
克魯斯假絲酵母 2-烷磺酸鈉 一水9型腺相關病Elisa
糙皮側耳 Flunarizine 2HCl硒蛋白PElisa
球毛殼(可訂購) 3-乙基-3-氧雜丁環甲硒蛋白P1Elisa
綠木霉 二三(1,10-鄰二氮雜菲)釕(Ⅱ)水合CD146分子Elisa
副豬嗜血桿 乙酰酮鋇整合αⅡβ3Elisa
假單胞 1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽B-激活因子受體Elisa