詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone | 100ul | 1~3天 |
商品介紹:
CCCP是一種質子載體(H+ ionophore),強效的線粒體氧化磷酸化解偶聯劑,促使線粒體內膜對H+產生通透性,導致線粒體內膜兩側的膜電位喪失,誘導凋亡發生。也可作用于葉綠體膜,抑制光合作用;CCCP還可抑制內質網-高爾基體(ER-Golgi)之間的蛋白轉運,高親和力結合細胞色素氧化酶。 CAS號:555-60-2 分子式:C9H5ClN4 分子量:204.62 儲存條件:-20℃保存 純度:≥97% (TLC) CCCP還具有其他功能: 1)在牛蛙交感神經方面的實驗表明,CCCP 可增強促黃體生成素釋放激素的釋放; 2)作為一種質子導體在葡萄糖存在的情況下影響E.coli 細胞活性; 3)對細胞內鈣水平的各種調節效應; 4)抑制脂肝酶的分泌; 5)部分抑制pH梯度活化的Cl-攝取以及刷狀緣膜的Cl-/Cl-交換等。 本品是溶于DMSO的CCCP溶液,濃度為50mM,體積為100μl(相當于1mg的總量),常用作一種陽性對照來誘導細胞凋亡,并配合線粒體膜電位檢測探針JC-10(貨號:J8050)來進行相關研究。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
白介15(IL15)英文名稱:IL15 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框103抗體包裝100g
白介13受體α2(IL13Rα2)英文名稱:IL13Rα2 ELISA Kit兒茶酚O基移位抗體包裝25g
白介13(IL13)英文名稱:IL13 ELISA Kit補體C1qTNF9鏈多肽抗體包裝5g
白介12B(IL12B)英文名稱:IL12B ELISA Kit平滑肌鈣調蛋白CNN2抗體包裝1g
白介12A(IL12A)英文名稱:IL12A ELISA Kit心肌病相關蛋白2包裝5g
白介11受體α(IL11Rα)英文名稱:IL11Rα ELISA Kit5號染色體開放閱讀框34抗體包裝100g
白介11(IL11)英文名稱:IL11 ELISA KitE1A激活基因激蛋白1抗體包裝25g
白介10(IL10)英文名稱:IL10 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框42抗體包裝5g
八聚體結合轉錄因子4(OCT4)英文名稱:OCT4 ELISA Kit豬瘟病抗體包裝1g
酰tRNA合成復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)英文名稱:AIMP1 ELISA Kit3號染色體開放閱讀框54抗體包裝5g
基己糖苷Bβ(HEXβ)英文名稱:HEXβ ELISA Kit2號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
基己糖苷Aα(HEXα)英文名稱:HEXα ELISA Kit豬瘟病抗體包裝5g
基端前心鈉肽(NT-ProANP)英文名稱:NT-ProANP ELISA Kit中心體蛋白110抗體包裝1g
基端前腦鈉(NT-ProBNP)英文名稱:NT-ProBNP ELISA Kit纖維包裝5g
阿黑皮原(POMC)英文名稱:POMC ELISA Kit分裂周期蛋白14B抗體包裝10ml
假單胞菌Pseudomonas│testosteroni 質量規格:>98.5%,BR,可用于培養異質性胞核核糖核蛋白M試劑盒鹽葫蘆巴堿;Trigonelline
金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質量規格:HPLC>97%,標準品異質性胞核核糖核蛋白L試劑盒鹽石蒜堿;Lycorine hydro
疣孢青霉Penicillium│verruculosum 質量規格:>98%,進分,sigma E1383 異質性胞核核糖核蛋白L試劑盒雅姆皂苷元 ;yamogenin
CCCP細胞凋亡誘導劑(50mM)銹赤蠟黃鏈霉 1-芐氧羰基-3-羥基氮雜環丁烷喋呤抗體Elisa
慢生根瘤 2,4-二溴吡啶-3-甲胃動蛋白2抗體Elisa
釀酒酵母 3,4-雙(二氟甲氧基)苯甲Ⅱ型膠原α1Elisa
泡盛曲霉 6-溴-7-氟喹啉無翅型MMTV整合位點家族成員1Elisa
馬沙門氏 1-Boc-2-T因子Elisa
白黃馬賽 1-二茂鐵基乙尿肌酐Elisa
黃曲霉 2-氯-4-甲氧基苯青霉Elisa
芽孢桿 N,N-雙(4-磺丁基)-3-鏈霉Elisa
布魯塞爾德克酵母 2-基-4-氟甲酯慶大霉Elisa
食有機物深海芽孢桿 6-氯-1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮相關抗原11AElisa
卡門柏青霉 3-氟-4-溴溴芐肝吸蟲Elisa
Methylibium 基二茂鐵全反鈷II型Elisa
釀酒酵母 H-89 肝吸蟲IgM抗體Elisa
毛栓孔 1-甲基-1H-吡唑-4-肝吸蟲IgG抗體Elisa
類芽孢桿屬 1-N-芐氧羰基哌-2-甲酸甲酯抗磷脂A2受體IgG抗體Elisa