Gram-Twort革蘭染色液公司*的產品：HPV18-E6/E6 protein /FITC 熒光標記人類狀瘤病18抗體IgG鄰酚酞 AR,溶
HPV16-E7/E7 protein/FITC 熒光標記人類狀瘤病16-E7抗體IgG鄰酚酞 AR,溶
H-ras/FITC 熒光標記原癌因H-ras抗體IgG偶氮膦Ⅰ AR,顯色劑
Hrasls3/HREV107/FITC 熒光標記HR

產品屬性：

中文名稱：Gram-Twort革蘭染色液

英文名稱：

產品規格：4×100ml

發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

度米芬英文名稱： Picfeltarraenin X腺苷單磷活化蛋白激γ2抗體包裝25g

對磺酰；4-羧基磺酰英文名稱： Stigmasterol glucoside血小板衍化生長因子β抗體包裝5g

多索茶堿英文名稱： Neamine 血小板衍化生長因子γ抗體包裝1g

厄多司坦英文名稱： RIFAMPIN QUINONE 血小板47蛋白抗體包裝5g

惡喹二英文名稱： Rifamycin相關血漿蛋白A2抗體包裝100g

二尼柳英文名稱： 7-ADCA血漿谷羧肽抗體包裝25g

二硫化四乙基秋蘭姆英文名稱： Piperacillin磷化腫瘤抑制基因P53抗體包裝250ml

伐地考昔英文名稱： Piperacillin撲克蒙蛋白抗體包裝100g

法莫替丁英文名稱： Cloxacillin Sodium Salt Monohydrate癌易感基因相關蛋白2包裝25g

反環鹽鹽；單氧化(MAO)抑制劑英文名稱： Cloxacillin Sodium Salt Monohydrate細小清蛋白抗體包裝1g

非布索坦英文名稱： Bleomycin A5 Hydrochloride 脂酰肌聚糖A抗體包裝100g

非那西丁英文名稱： Erythromycin ethylsuccinate原鈣粘蛋白11抗體包裝25g

非諾洛芬鈣英文名稱： GriseofulvinP選擇糖蛋白配體1抗體包裝500g

芬達唑；硫咪唑英文名稱： Tivantinib, ARQ 197蛋白激N2抗體包裝100g

芬布芬英文名稱： Ethyl vanillinG蛋白偶合受體激2抗體包裝25g

蟻巢傘屬Termitomyces│sp. 質量規格：>98%,BR,日本進口分裝混合系列蛋白激樣結構域試劑盒白樺脂;Betulin

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>95%,葡萄籽提取物混合淋巴反應封閉因子試劑盒濱蒿內酯;Scoparone

綠針假單胞菌Pseudomonas│chlororaphis 質量規格：UV>95%,分析標準品蛔蟲抗體試劑盒酰芍藥苷;benzoylpaeoni
Gram-Twort革蘭染色液釀酒酵母 3-磺酰基5-羥基色氨酸Elisa

貝萊斯芽胞桿 2-(2-氟吡啶-3-基)二肽基肽ⅣElisa

木賊鐮孢 4-氟苯磺酰過氧化還原1Elisa

淺灰白鏈霉 3-甲基-2-吡啶甲酸孕Elisa

假單胞屬 3-氨基-5-硝基三氟甲苯明膠AElisa

釀酒酵母 2-乙酰基-4-丁酰基基質金屬蛋白8Elisa

玉米大斑病 3-甲基三氟甲苯谷氨酸脫羧Elisa

薄花邊傘 二酐蛋白激BElisa

東方伊薩酵母 乙酯維生BElisa

棲熱 N,N'-二異基乙二維生EElisa

金龜子綠僵 2-煙酸甲酯鈣調蛋白Elisa

枯草芽孢桿 4-氨基-3-硝基三氟甲苯兒茶酚氧位轉移抗體Elisa

鴨肝炎病 2-氟-5-硝基三氟甲苯UbElisa

交鏈孢 9-溴-10-(1-萘基)蒽泛Elisa

*無色桿 三異酯蛋白Elisa 

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)