詳細介紹
商品介紹:
SAR245409是一種有效的PI3K抑制劑,抑制p110α,p110β,p110γ和p110δ,IC50分別為39,113,9和43nM,也抑制DNA-PK(IC50=150nM)和mTOR(IC50=157nM)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:934493-76-2 別名:Voxtalisib;XL765 純度:98.93% 分子量:270.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
SAR245409 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
尖孢鐮刀菌Cy5標記的兔抗猴IgMAnti-USP44 Antibody蛋白磷1調節因子亞基1B(PPP1R1B)
噬肌畢赤酵母Cy5.5標記的兔抗猴IgMAnti-USP21 Antibody蛋白磷1調節因子亞基18(PPP1R18)
棒曲霉Cy7標記的兔抗猴IgMAnti-VAMP7 Antibody蛋白酪磷樣蛋白A(PTPLA)
卷枝毛霉PE標記的兔抗猴IgMAnti-USP25 Antibody蛋白酪磷受體R(PTPRR)
解脂復膜孢酵母APC標記的兔抗猴IgMAnti-VAPB Antibody蛋白酪磷受體O(PTPRO)
運動節桿菌Alexa Fluor 350標記的兔抗猴IgMAnti-VAPB Antibody蛋白酪磷受體N(PTPRN)
赤水太白山菌Alexa Fluor 488標記的兔抗猴IgMAnti-VASP Antibody蛋白酪磷受體K(PTPRK)
Ramlibacter sp.Alexa Fluor 555標記的兔抗猴IgMAnti-VCAM1 Antibody蛋白酪磷受體H(PTPRH)
香菇生物標記的兔抗猴IgMAnti-VCAM1 Antibody蛋白酪磷受體G(PTPRG)
馬紅球菌堿性磷(AP)標記的兔抗猴IgMAnti-USP7 Antibody蛋白酪磷受體B(PTPRB)
韓國溶桿菌膠體金標記的兔抗猴IgMAnti-VCAN Antibody(PB0480)蛋白酪磷ⅣA3(PTPⅣA3)
蘇云金芽孢桿菌辣根過氧化物標記的兔抗猴IgMAnti-VCAM1 Antibody蛋白酪激2β(PTK2β)
Hymenobacter perfususFITC標記的兔抗猴IgMAnti-VCL Antibody蛋白聚糖3(PRG3)
三棱孢小囊菌羅丹明標記的兔抗猴IgMAnti-VCL Antibody蛋白激抑制因子γ(PKIγ)
假單胞菌羅丹明標記的兔抗小鼠IgGAnti-VCL Antibody蛋白激抑制因子β(PKIβ)
豬霍亂沙門氏菌豬霍亂亞種膠體金標記的兔抗小鼠IgGAnti-VCP Antibody蛋白激抑制因子α(PKIα)
PDZ結構域PDZK4蛋白抗體馬紅球菌小鼠腦膜組織提取物
PDZ結構域PDZK7蛋白抗體巧克力微桿菌小鼠腦動脈血管組織提取物
PDZ結構域PDZK8蛋白抗體粘氏菌粘質亞種小鼠甲狀腺組織提取物
蛋白酪激9抗體紅串紅球菌小鼠乳腺組織提取物
PI3K抑制劑(SAR245409)泡盛曲霉變種 偽原纖細薯蕷皂苷
亞利桑那沙門氏 原纖細薯蕷皂苷
榛色青霉 鴉膽子A;鴉膽子苦A
穗霉屬 鴉膽亭
輪枝孢屬 白射干
木蹄層孔 巴利森苷E
高盧蜜環 巴利森苷C
孟氏假單胞 巴利森苷B
疣孢 松柏苷
紅緣擬層孔 黃芩-7-甲
巴氏醋桿 異苦參酮
產氨短桿 靈芝酸C2
釀酒酵母 蘆西定
淡紫擬青霉 密力特苷
枯草芽孢桿 去氧土大黃苷;甲基虎杖苷