瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液公司正在出售的產(chǎn)品：HOXA10 /FITC 熒光標(biāo)記HOXA10抗體IgG2-丁酮 Standard for GC, ≥99.9% (GC)
HOXB4/FITC 熒光標(biāo)記HOXB4抗體IgG戊丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
PSGD/HOXB13/FITC 熒光標(biāo)記同源盒蛋白HOXB13抗體IgG正丁 Standard for GC

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

布南色林英文名稱： Nystatin配對(duì)盒基因9抗體包裝1g

雌莫司汀磷鈉英文名稱： SULBENICILLINP-鈣粘附分子抗體包裝5g

醋唑英文名稱： Acetylspiramycin腺苷環(huán)化激活肽-38抗體包裝100mg

醋磺米英文名稱： Potassium trichloroammineplatinate(II)腫瘤抑制基因P53蛋白抗體（野生型P53）包裝5g

醋優(yōu)力司特；醋烏利司他英文名稱： Sisomicin腫瘤抑制基因p63α抗體包裝100mg

醋增血壓英文名稱： spectinomycin磷二酯4A8抗體包裝100g

地克珠利英文名稱： 5-MTHF；5-Methyltetrahydrofolic Acid Calcium Salt Trihydrate血小板源性生長(zhǎng)因子AB+BB抗體包裝25g

地拉考昔英文名稱： Kitasamycin增殖核抗原抗體包裝100g

地拉羅司,去鐵斯若英文名稱： josamycin腦特異性多肽蛋白19抗體包裝25g

地馬格列英文名稱： Midecamycin Acetate三磷腺苷門控陽(yáng)離子通道蛋白抗體包裝5g

地美司鈉英文名稱： Etimicin硫氧還蛋白過氧化物Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體包裝1g

地美溴英文名稱： Paromomycinp53凋亡相關(guān)作用蛋白PMP22抗體包裝250mg

地瑞那韋乙鹽英文名稱： Teicoplanin 磷核糖咪唑羧化抗體包裝100g

地塞米松環(huán)氧解物英文名稱： Nystatin神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g

度骨化英文名稱： Inosine 5'-Monophosphate(IMP)腫瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS1抗體包裝1g

核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格：>60%,BR活化凝血因子X試劑盒白頭翁皂苷B4;Anemoside B4

青紫黑鏈霉菌Streptomyces│glaucovioatratus 質(zhì)量規(guī)格：>95%活化凝血因子Ⅻ試劑盒畢靈堿;(+)-Bicucullin

聚多曲霉Aspergillus│sydowii 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定活化蛋白C試劑盒斑蝥;Cantharidin
瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液光陽(yáng)微泡 (R)-(-)-2-對(duì)甲苯磺酸-1-苯基-1,2-乙二谷氨酸-天冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體Elisa

球孢白僵 2-苯甲基溴α7型神經(jīng)煙堿能受體Elisa

杏鮑菇 2,4,6-基芐α7型神經(jīng)煙堿能受體Elisa

枯草芽孢桿枯草亞種 2--3,5-二溴吡啶過氧化氫Elisa

枝彎孢 6-氟煙酸球蛋白Elisa

圓酵母屬 4'-氟苯乙酮白喉IgG抗體Elisa

蘋果輪紋病 1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷-3-酮二肽基肽ⅣElisa

小單孢 3-氟-4-甲氧基豆莢蛋白Elisa

鼠傷寒沙門氏 4-氟-3-甲基-胱抑Elisa

栗疫 6-氟-2-甲基白介37Elisa

假單胞 2,4,6-三金屬蛋白Elisa

利古里亞游動(dòng)放線 2-氨基噻唑-5-甲酸內(nèi)源性糖皮質(zhì)Elisa

釀酒酵母 3-甲基吡唑-5-甲酸乙酯NeuroD1Elisa

豬布魯氏 2-溴-3-氟吡啶血清蛋白Elisa

蠟狀芽孢桿 2--3-羥基吡啶巨噬激蛋白Elisa