產(chǎn)品屬性:
中文名稱:melatonin受體激動劑(Ramelteon)
英文名稱:Ramelteon
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Ramelteon是高效選擇性的melatonin受體激動劑,結合人melatonin1和melatonin2受體的Ki值分別為14和112pM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:196597-26-9 別名:TAK-375 純度:99.92% 分子式:C??H??NO? 分子量:259.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
褐粘褶菌微小染色體維持缺陷蛋白3抗體Human NEDD4L ELISA Kit皮質(zhì)抑/皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)ELISA Kit
Marella endophytica基質(zhì)金屬蛋白-26抗體Human HK1(Hexokinase-1) ELISA Kit皮質(zhì)/腎上腺(CORT)ELISA Kit
堅強芽孢桿菌絲裂原活化蛋白激激4抗體Human NEK3 ELISA Kit皮質(zhì)(CORT)ELISA Kit
白僵菌MYOZ抗體Human NEK11 ELISA Kit皮質(zhì)-3(Cortxin-3)ELISA Kit
毛柄金錢菌(金針菇)單核趨化蛋白2抗體Human NDUFS1 ELISA Kit皮質(zhì)類固結合球蛋白(CBG)ELISA Kit
黃曲霉甲基化樣蛋白11抗體(N端)Human NEK9 ELISA Kit皮質(zhì)(Cortisol)ELISA Kit
大雙歧桿菌大腸癌腫瘤突變蛋白抗體Human NDUFS3 ELISA Kit皮膚淋巴相關抗原(CLA)ELISA Kit
彩色豆馬勃絲/蘇蛋白激MARK4抗體Human NELF ELISA Kit皮膚蛋白(DPT)ELISA Kit
多變毛霉甲肽水解抗體Human NDUFS5 ELISA Kit皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA Kit
假單胞菌磷化絲裂原活化蛋白激激2抗體Human NDUFS6 ELISA Kit皮動蛋白(CTTN)ELISA Kit
溜曲霉磷化絲裂原活化蛋白激激3抗體Human FOXO3(Forkhead box protein O3) ELISA Kit胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA Kit
粘性放線菌絲裂原活化蛋白激激5抗體Human NDUFV1 ELISA Kit泡狀過表達癌癥促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)ELISA Kit
戈壁發(fā)鏈霉菌磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human XDH(Xanthine dehydrogenase/oxidase) ELISA Kit膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA Kit
黑曲霉磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human MYBBP1A(Myb-binding protein 1A) ELISA Kit膀胱癌抗原(UBC)ELISA Kit
鏈格孢磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human TLR4(Toll-like receptor 4) ELISA Kit排序連接蛋白3(SNX3)ELISA Kit
總狀共頭霉磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human MYBPC1 ELISA Kit帕金森氏病2Parkin(Park2)ELISA Kit
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級;紫杉
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分sigma左旋多巴
堅強芽胞桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格:>98%芝麻林
melatonin受體激動劑(Ramelteon)ECE1 內(nèi)皮轉化1抗體丁異戊酯 99%
ECE2 內(nèi)皮轉化2抗體丁異戊酯 GCS,≥99.5% (GC)
ECG2 食道癌相關因抗體丁異戊酯 ≥98%, FCC, Kosher, FG
ECM1 外質(zhì)蛋白1抗體己異丁酯 98%
ECP 嗜性粒陽離子蛋白抗體異戊酯 AR,99%
ED-1 外胚層發(fā)育不良抗體異戊酯 CP,98%
EDNRA 內(nèi)皮受體A抗體異戊酯 ≥99%, FCC, FG
EEF2 真核翻譯延長因子2抗體異戊酯 mixture of isomers, ≥97%, FG
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)