詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GSK2636771 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
GSK2636771是一種有效的,選擇性的PI3Kβ抑制劑,無PTEN的細胞株對其敏感。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1372540-25-4 純度:99.10% 分子量:433.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
意大利酵母血栓A2受體抗體Anti-HNRNPL Antibody晚期糖基化終末產物受體(AGER)
布魯氏菌 生物Ⅴ型Toll樣受體11抗體Anti-HOMER3 Antibody晚期糖基化終末產物(AGE)
金霉鏈霉菌(生金色鏈霉菌)血小板反應蛋白抗體Anti-HOXA10 Antibody烷基甘油單加氧(AGMO)
無端粒相關蛋白2/端粒逆轉錄抗體Anti-HOXA10 Antibody外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)
圓酵母屬血小板反應蛋白2/凝血敏感蛋白2抗體Anti-HOXA10 Antibody外周蛋白2(PRPH2)
白色彎曲嗜菌四分子交聯體17抗體(四旋蛋白)Anti-HOXA11 Antibody外周蛋白(PRPH)
赤霉屬髓系觸發受體1抗體Anti-HOOK2 Antibody外異蛋白A(EDA)
大腸埃希氏菌緊密連接蛋白2抗體Anti-HOOK3 Antibody外血小板溶1(EPPK1)
枝狀枝孢磷化埃茲蛋白抗體Anti-HOXA3 Antibody外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)
節桿菌單克抗體Anti-HOXA4 Antibody外生骨疣蛋白2(EXT2)
冷海水黃桿菌微管相關蛋白α6抗體Anti-HOXA5 Antibody外生骨疣蛋白1(EXT1)
淡紫紫霉T淋巴轉錄調節因子TFEB抗體Anti-HOXA6 Antibody外切體成分9(EXOSC9)
玉米乳桿菌轉鐵蛋白單克抗體Anti-HOXA7 Antibody外切體成分8(EXOSC8)
鴨疫里氏桿菌促甲狀腺抗體Anti-HOXB9 Antibody外切體成分7(EXOSC7)
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)促甲狀腺單克抗體Anti-HP Antibody外切體成分6(EXOSC6)
皺木耳磷化轉化生長因子β活化激1Anti-HOXD11 Antibody外切體成分5(EXOSC5)
神經突觸13抗體谷棒桿菌人神經元細胞
多配體聚糖結合蛋白2抗體宇佐美曲霉變種人神經星形膠質細胞
胞吐分泌蛋白Sec6抗體布氏乳桿菌人腦動脈血管平滑肌細胞
突觸結合蛋白11抗體乳桿菌屬人腦膜成纖維細胞
PI3Kβ抑制劑(GSK2636771)糞生毛殼 鈹/Be7α-羥膽固 Elisa
彩色豆馬勃 覆盆子酮賴氨酰吡碇Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生專化型 吡哌酸羥賴氨酰吡碇Elisa
枯草芽胞桿枯草亞種 鋇/BaαS1酪蛋白Elisa
豬鏈球 1-乙基-3-甲基咪唑四氟酸鹽[用于熔鹽]αS2酪蛋白Elisa
白地霉 /Bβ酪蛋白Elisa
塔賓曲霉 金/Auκ酪蛋白Elisa
聚生殼 阿昔洛韋輸血傳播病1型抗體Elisa
香菇 砷/As白介33Elisa
多主殼 苯溴馬隆Toll樣受體5Elisa
嗜熱鏈球 鋁/Al硒蛋白PElisa
穗狀平臍蠕孢 銀/Ag抗N蛋白抗體Elisa
杜拉柱隔孢 拉莫三微粒體三酰甘油轉移Elisa
腫紅皮孔 鋁、砷、、鋇、鈹、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、汞、、鎂、錳、鉬、鎳、鉛、銻、硒、錫、鈦、、釩、鋅、豬瘟病E2抗體Elisa
貝氏不動桿 硒、碲/Se, Te抑制AElisa